副猪嗜血杆菌Wza基因表达与结构预测分析

伊立超，娄安钢

副猪嗜血杆菌Wza基因表达与结构预测分析

伊立超，娄安钢*

（延边大学农学院，吉林 延吉 133000）

为了表达副猪嗜血杆菌Wza基因并获得表达产物的理化性质，试验参考GenBank中发表的副猪嗜血杆菌Wza基因序列（KC795491.1）进行重组真核表达质粒（pcDNA3.1-Wza）的构建，并在哺乳动物细胞293细胞鉴定蛋白的表达，同时分析Wza蛋白的理化性质，并预测其二级结构，并用在线软件预测Wza蛋白质的三级结构，为进一步探究其致病性提供理论基础。结果表明，成功构建pcDNA3.1-Wza质粒，并表达Wza蛋白。理化性质分析表明，其抗原指数较高。二级结构主要是β-折叠和无规卷曲，并且有许多抗原表位区域。

副猪嗜血杆菌；Wza基因；基因扩增；克隆；理化性质分析

副猪嗜血杆菌（Haemophilusparasuis，HPs）是一种多态性，非运动性，革兰氏阴性微细菌，属于巴斯德杆菌科的嗜血杆菌属。在某些情况下，它会侵入人体并引起以纤维性多发性浆膜炎、关节炎和脑膜炎为特征的全身性疾病。它已成为我国猪保育期间最普遍的继发性细菌感染和仔猪死亡的主要原因之一，因此，找到关键的致病因素拮抗细菌的致病尤为重要。副猪嗜血杆菌的致病因素研究一直是该领域的重点之一。目前，神经氨酸酶、菌毛、转铁蛋白和脂多糖都被认为是HPs的致病因子[1-2]。研究表明，有毒力的菌株可以抑制猪肺泡巨噬细胞（PAM）的吞噬作用，并且在与PAM相互作用后可以形成更明显的荚膜；而无毒力的菌株则不能形成荚膜[3-4]。但是，一些研究还发现，从健康猪的上呼吸道分离出的HPs菌株也有荚膜，但从病变部位中分离出的HPs没有荚膜产生，这表明HPs荚膜多糖合成基因（CapD）存在于HPs毒力菌株[1]。……