斜带石斑鱼ERP44基因的克隆与表达分析*

徐泳娴，邹子鸿，汤菊芬，鲁义善，简纪常，蔡 佳,2**

(1.广东海洋大学水产学院，广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室，广东省水产经济动物病害控制重点实验室，广东湛江 524088；2.广西科学院，广西北部湾海洋研究中心，广西海洋天然产物与组合生物合成化学重点实验室，广西南宁 530007)

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斜带石斑鱼(Epinepheluscoioides)是我国南方主要的海水养殖鱼类，但是近年来虹彩病毒病、神经坏死病毒病、弧菌病频发，对该品种的养殖造成了严重的危害[1]。目前，石斑鱼的抗病免疫机理并不十分清楚，这不利于水产病害的防控及其药物研发。以往的研究表明，病原的感染能诱导动物细胞产生大量非折叠蛋白，引起内质网应激，进而激活宿主的免疫反应[2]。在这一过程中，蛋白质二硫键异构酶(Protein Disulfide Isomerase，PDI)在内质网中高表达，通过硫醇依赖性的滞留(Thiol-Mediated Retention，TMR)来产生混合的二硫键，在ERP44蛋白介导下使蛋白质处于还原状态。ERP44是一类参与TMR过程的主要分子伴侣[3]，能与多种生物分子相互作用，例如免疫球蛋白M (IgM)、免疫球蛋白J链、免疫球蛋白K链[4]，白介素12 (IL-12)[5]，脂联素(Adiponectin)[6]，甲酰基产生酶/硫酸酯酶修饰因子1(FGE/Sumf1)[7]，Ero1α-β[8，9]，Ⅰ型肌醇1,4,5-三磷酸受体(Inositol 1,4,5-trisphosphate receptors 1，IPR3R1)[10]，ER-高尔基中间体蛋白53 (ERGIC-53)[11]和硫氧还原蛋白4 (Peroxiredoxin 4，Prx4)[12]等。在ERP44的介导下，蛋白质在内质网中发挥停留、分子聚合、蛋白分泌或折叠[13]、钙离子控制、细胞信号传导、维持氧化还原稳态以及载体蛋白等作用[14-17]，进而引起细胞的免疫应答。目前，已有学者报道不同宿主中ERP44的生理功能及其作用机理。Tian等[18]研究发现ERP44与鼻咽癌的进展有关，其能与ATP柠檬酸裂解酶发生相互作用，调控上皮细胞-间充质转化来促进鼻咽癌细胞恶性表型的形成。……