免疫亲和柱净化-高效液相色谱法测定饲料中玉米赤霉烯酮的不确定度评定

华洵璐，张海涛，董曼佳，王红连，严艺琳

(江苏省苏微微生物研究有限公司，江苏 无锡 214063)

玉米赤霉烯酮(ZEN)又称F-2毒素，是一种2,4-二羟基苯甲酸内酯类化合物，分子式为C18H22O5，主要由镰刀菌属菌株(如禾谷镰刀菌F.graminearum)产生[1]；其耐热性较强，主要污染玉米、小麦、大米、大麦、小米和燕麦等谷物[2-3]。玉米赤霉烯酮具有类雌激素作用，以雌性动物的生殖系统为靶器官，引起雌激素水平升高，产生雌激素亢进症，使繁殖机能出现异常[4]；此外，玉米赤霉烯酮通过直接损伤免疫系统，导致动物抵抗力下降；通过氧化损伤，引起动物肝肾组织退行性变化，造成肝肾功能紊乱；通过损伤内分泌系统，导致动物内分泌紊乱，给养殖业带来巨大经济损失[5-6]。玉米赤霉烯酮还可通过食物链在人体中蓄积，给人类健康造成极大的危害[7]。我国《饲料卫生标准》GB 13078—2017明文规定，仔猪、母猪和其他猪的配合饲料，玉米赤霉烯酮含量分别不得超过150、100和250 μg/kg，犊牛、羔羊、泌乳期精料补充料和其他配合饲料不得超过500 μg/kg[8]。

玉米赤霉烯酮测定方法主要有酶联免疫吸附法(ELISA)[9]、胶体金法(GICT)[10]、色谱串联质谱法(LC-MS/MS)[11]和高效液相色谱法(HPLC)[12]。免疫亲和柱净化-高效液相色谱法是一种免疫亲和净化与色谱法相结合的测定技术，通过与抗体的特异性结合，达到快速、高效、专一地从样本中分离出待测物，该方法具有较高的准确度、灵敏度和良好的选择性、重现性，特别适合于饲料等复杂样本的精准测定，因而成为玉米赤霉烯酮检测的权威方法[13-14]，并专门制定了该方法用于饲料中检测的国家标准[15]。……