植物外源多酚氧化酶酶促合成茶黄素的研究进展

李 东，李洁媛，雷 雨，童 凯，姜 斌，李亚兰，唐 璇

四川轻化工大学 生物工程学院，四川 宜宾 644000

1957年，Roberts E.A.H[1]首次在红茶中发现一类由茶多酚类物质氧化缩合形成的橙黄色物质，并将这类物质命名为茶黄素（theaflavins，TFs），这是一类易溶于乙酸乙酯的、含有多个羟基或酚羟基的苯骈卓酚酮结构的物质。至今，研究者们已在自然界中发现了12种天然的茶黄素组分[2]，其中最主要的组分是茶黄素（theaflavin，TF）、茶黄素-3-没食子酸酯（theaflavin-3-gallate，TF-3-G）、茶黄素-3'-没食子酸酯（theaflavin-3'-gallate，TF-3'-G）和茶黄素-3，3'-双没食子酸酯（theaflavin-3, 3-digallate，TFDG）。虽然，茶黄素类物质在红茶中的含量仅在1%左右，但却是影响红茶色泽和滋味品质的关键性因素[3]。据现有研究[4]表明，茶黄素可有效降低血糖血脂且抗突变、防癌抗癌，可广泛应用于保健品和医药领域。

随着对茶黄素结构和性质的不断认识，研究者们制备茶黄素的方法也从茶汤中直接提取转变成体外模拟氧化系统制备茶黄素[5]。而根据催化剂的种类，研究者们将体外模拟氧化系统分为化学氧化系统和酶促氧化系统[6]。其中，化学氧化系统所利用的催化剂是无机氧化剂，由于催化剂不具备底物专一性，导致产品纯度低，含有较多副产品，且会对环境造成损害，在推广运用中受到一定限制[7]。目前，酶促氧化合成茶黄素所利用的催化剂绝大多数是来自植物源的多酚氧化酶（polyphenol oxidase，PPO），因其酶底物专一，生成产品纯度较高，能较大程度地提高茶黄素浓度，降低生产成本且天然无害，故广受关注和运用[8]。

1 酶促合成茶黄素PPO的酶源筛选

1983年，Robertson A[9]等人首次在植物体外模拟酶促氧化系统，结果显示在半纯化的PPO作用下，高纯度的儿茶素可在体外制备得到茶黄素。……