LC-MS/MS法同时测定人血浆中咪达唑仑和1-羟基咪达唑仑的浓度*

沈 叶，黄烽如，房秋晨，孙鲁宁**，王永庆**

1 徐州医科大学 江苏省新药研究与临床药学重点实验室，徐州 221004；2 南京医科大学第一附属医院 临床药理研究室，南京210029

细胞色素P450（cytochrome P450，CYP450）是人体最重要的药物代谢酶之一，其主要亚型（CYP3A4/5）参与50%以上临床用药的代谢[1，2]。许多外源性物质可以作为诱导剂或抑制剂影响CYP3A底物的体内暴露。因此，确定CYP3A 及其同工酶的活性对于评估药物相互作用至关重要[3]。目前，评价人体内CYP3A 酶活性的方法主要有探针药物法[4]（如咪达唑仑、氨苯砜、红霉素等）和内源性生物标志物法[5，6]。咪达唑仑被我国药监局和美国药品监督管理局药品审评中心推荐为CYP3A 酶活性评价的首选探针底物[7]。咪达唑仑（1-甲基-8-氯-6-（2-氟苯基）-4H-咪唑并[l，5-a][l，4]苯并二氮杂艹卓）作为使用最为广泛的苯二氮唑类短效中枢神经系统抑制剂，具有镇静、催眠、抗惊厥、肌肉松弛的作用[8]。咪达唑仑作为探针药物进入人体后经CYP3A 代谢生成主要代谢物1-羟基咪达唑仑[9]。

目前，文献报道测定人血浆中咪达唑仑的分析方法主要为高效液相色谱法[10，11]和液相色谱-串联质谱法[8，12～14]。然而，文献[10，11]中建立的方法灵敏度较低，分析时间较长。文献[13，14]开发的方法前处理复杂，需要萃取或者旋干的操作，分析时间较长。现建立了一种前处理简单快捷、线性范围宽、高效灵敏的同时测定人血浆中咪达唑仑和1-羟基咪达唑仑的HPLC-MS/MS 法，可应用于咪达唑仑作为CYP3A 探针的临床药物相互作用的研究。

1 仪器与药品、试剂

1.1 仪器

1290 Infinity 高效液相色谱仪（美国安捷伦科技有限公司），包括G4220A 二元高压泵；……