高效液相色谱法测定苏打水中安赛蜜含量的不确定度评价

李 璐 张 哲 边 广 刘 冰

(泰安市疾病预防控制中心， 泰安 271000)

1 前言

为了提高测量结果表达的准确性和评定结果质量，本文依据GB/T 5009.140-2003《饮料中乙酰磺胺酸钾的测定》，采用高效液相色谱法测定了苏打水中安赛蜜的含量，并根据JJF1059.1-2012 《测量不确定度评定与表示》对其含量的不确定度进行了分析。

2 材料与方法

2.1 材料与试剂

苏打水 市售；苯甲酸溶液标准物质(1000 μg/mL)， GBW(E) 100167 1805；甲醇(CH3OH)， 色谱纯；硫酸铵((NH4)2SO4)优级纯；硫酸 (H2SO4)分析纯；乙腈(CH3CN)色谱纯；超纯水(Ω=18.2) 。

2.2 仪器与设备

超高效液相色谱仪(Ultimate 3000)；电子天平(ALC-210.4)；超声清洗仪(KQ3200DE)；超纯水机(CASCADA I)；微孔滤膜(QYGL-002)。

2.3 实验方法

2.3.1样品处理

按照GB/T 5009.140-2003 《饮料中乙酰磺胺酸钾的测定》对样品进行处理。准确称取约2 g(精确到0. 001 g)试样于50 mL容量瓶中，加超纯水至刻度，混匀后将试样放入超声清洗仪中超声脱气。取适量溶液通过0. 45 μm滤膜，滤液作HPLC分析测定用。

2.3.2标准溶液配制

准确吸取安赛蜜溶液标准物质2.00 mL于50 mL容量瓶中，用超纯水定容，配制浓度为40.0 μg/mL安赛蜜标准中间溶液。分别准确吸取1.00 mL、2.00 mL、3.00 mL、4.00 mL、5.00 mL苯甲酸标准中间溶液，用超纯水定容至10 mL，配制成浓度分别为4.00 μg/mL、8.00 μg/mL、12.0 μg/mL、16.0 μg/mL、20.0 μg/mL的标准系列工作溶液。

2.3.3色谱条件

色谱柱：Acclaim®120 C18柱(柱长250 mm，内径4.6 mm，粒径5 μm)，柱温：25℃；流动相：0.02 mol/L硫酸铵溶液(800 mL)+甲醇(150 mL)+乙腈(50 mL)+10%硫酸溶液(1 mL)；流速：1.0 mL/min；紫外检测器，检测波长：214 nm；进样量：10μL。

3 不确定度来源分析

依据标准GB/T 5009.140-2003 《饮料中乙酰磺胺酸钾的测定》，样品中安赛蜜含量的计算公式为：

其中x为样品中安赛蜜含量(mg/kg)；ρ为由标准曲线得出的样品溶液中安赛蜜的浓度(μg/mL)；V为样品定容体积(mL)；m为样品质量(g)。

从样品质量、样品溶液体积和样品溶液浓度3个方面，分析测定安赛蜜含量的不确定度来源主要有样品称量、样品溶液配制、标准溶液配制、仪器的响应值和加标回收率等方面[6-10]。……