SDS 和SAP 前处理联合MALDI-TOF MS 在报阳血培养样本快速病原菌鉴定中的价值

余佳佳， 李媛睿， 刘 瑛

（上海交通大学医学院附属新华医院检验科，上海 200092）

血流感染是临床最主要的全身感染性疾病，严重威胁患者的生命安全；血流感染性休克引起低血压后，有效的治疗措施每延迟1 h，患者生存率降低7.6%[1]。血培养是血流感染诊断的金标准[2]，阳性血培养样本中病原菌的快速鉴定可为临床及时、有效的抗感染治疗提供重要依据[3]。按照传统临床微生物检测的流程，血培养报阳后需要16～24 h才能出具病原菌的鉴定结果，无法满足临床诊疗的需求。基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry，MALDI-TOF MS）可用于阳性血培养样本的直接鉴定，根据对血培养样本前处理方法的不同可以分为试剂盒提取法[4]、血细胞裂解法[5]、差速离心法[6]和分离胶法[7]。其中，血细胞裂解法中使用的裂解试剂主要有十二烷基硫酸钠（sodium dodecyl sulfate，SDS）[8]和皂甙（saponin，SAP）[5]。本研究拟评估SDS和SAP前处理联合MALDI-TOF MS对阳性血培养样本进行快速鉴定的应用价值。

1 材料和方法

1.1 样本来源

收集2018年4月—2019年4月上海交通大学医学院附属新华医院阳性血培养样本296例。

1.2 仪器和试剂

BACTECTMFX血培养系统及配套血培养树脂需氧瓶和含溶血素厌氧瓶、MALDI-TOF MS仪及配套Microflex Biotyper3.0鉴定分析软件、96孔金属靶板、α-氰基-4-羟基肉桂酸（alphacyano-4-hydroxyc innamic acid，HCCA）基质（美国Bruker Daltonik公司）；电热恒温培养箱（上海一恒科学仪器有限公司）；Centrifuge 5471R台式高速冷冻离心机和微量移液器（德国Eppendorf公司）。10% SDS（南通Beyotime公司）；SAP（南京酷尔生物公司）；甲酸、乙腈和三氟乙酸（美国Sigma-Aldrich公司）；血平板、麦康凯平板、革兰染液（上海伊华生物技术有限公司）；巧克力平板（上海科玛嘉微生物技术有限公司）。……