穿心莲内酯通过Notch信号通路抑制前列腺癌 骨转移细胞体外生物学行为的研究

钟少文, 王斌*, 黄帅, 林卓远, 刘畅, 陈斌伟

(广州医科大学 附属第二医院 1.骨科, 2.泌尿外科, 广东 广州 510260)

前列腺癌(prostatic cancer，PCa)是全球男性最常见的恶性肿瘤之一[1]，也是导致癌症相关死亡的第5大原因[2]，其特点是骨转移发生率高[3]. 骨转移患者的治疗是当前面临的一大挑战，越来越多的研究趋向于从传统中草药中寻找治疗骨转移的新疗法[4-5]. 穿心莲内酯(andrographolide，ANDRO)是天然植物草本穿心莲中提取的主要有效成分，目前已知具有抗氧化、抗炎、免疫调节、抗肿瘤、治疗心脑血管疾病等多种药理作用[6-7]. 既往研究表明ANDRO对前列腺癌[8-9]、结直肠癌[10]等多种肿瘤具有一定的抑制作用，但目前尚无关于ANDRO是否抑制前列腺癌骨转移病灶细胞体外迁移、侵袭及黏附能力及其作用机制的报道.本研究利用人源性的前列腺癌骨转移细胞株PC-3和C4-2B进行相关实验，研究 ANDRO对PC-3和C4-2B细胞体外增殖、细胞周期、迁移及侵袭等生物学行为的影响，并进一步探讨其作用机制可能通过抑制Notch信号通路及肿瘤转移相关蛋白基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2，MMP2)、基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9，MMP9)、细胞间黏附分子-1(intercellular cell adhesion molecule-1，ICAM-1)的表达，为进一步研究及临床应用提供必要的理论依据.

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 细胞株

人前列腺癌骨转移细胞株PC-3、C4-2B购自ATCC(美国典型培养物保藏中心，美国)，并存放在液氮中保存.

1.1.2 主要试剂与仪器

ANDRO购自美国Sigma公司. 1640培养基、体积分数为0.25%胰蛋白酶-EDTA(1×)、胎牛血清、青霉素/链霉素购自Gibco 公司. Notch信号分子1(Notch signaling molecule 1, Notch-1)、胞内结构域(Notch intracellular domain, NICD)、hairy 相关转录因子1(hairy and enhancer of split-related with YRPW motif1, Hes-1)、基质金属蛋白酶MMP2、MMP9、ICAM-1、GAPDH(14C10)等抗体均购自CST公司(Cell Signaling Technology).

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