DLEU2下调miR-374a-5p对肝癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的影响

金浩 余佳 王梓瑜 乔鸥 王军 韩江 李兆连

(1云南省第一人民医院(昆明理工大学附属医院)普通外科，云南 昆明 650032；2武汉大学人民医院肝胆外科)

肝癌是常见的消化系统恶性肿瘤之一，病死率高〔1〕。治疗仍然采用外科手术为主的综合治疗方式，化学治疗、放射治疗等多元化治疗也取得了较大进展〔2〕。随着医学的不断发展，靶向治疗已成为肝癌治疗的新途径，靶向药物的出现给肝癌患者带来了新希望〔3〕。长链非编码RNA(LncRNA)是基因调控的重要组成部分，在表观遗传水平和转录中发挥重要的调控作用，研究发现，LncRNA参与肝癌的发生发展、预后治疗等过程〔4〕。DLEU2在宫颈癌中低表达，过表达DLEU2能抑制宫颈癌细胞Hela和Caski的增殖、迁移和侵袭〔5〕。DLEU2通过miR-16-1影响喉癌细胞的增殖，迁移和侵袭〔6〕。而DLEU2对肝癌的影响未见报道。LncRNA作为内源竞争RNA(ceRNA)调控miRNA丰富了肝癌的发生发展机制〔7〕。近年来研究发现，体内特定miRNA的表达能抑制肿瘤细胞增殖、转移及复发〔8〕。miR-374在肝癌细胞中上调表达〔9〕；miR-374a高表达能促进肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭〔10〕。本文旨在研究DLEU2对肝癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的影响及其与miR-374a-5p的调控机制，为肝癌的早期诊断和治疗提供新靶点和新方法。

1 材料与方法

1.1材料 肝癌细胞HepG2、BEL-7402和正常肝细胞HL-7702购自中国科学院上海细胞库；胎牛血清、RPMI-1640培养基、胰蛋白酶购自美国Gibco公司；LipofectamineTM2000转染试剂购自美国Invitrogen公司；MTT试剂盒、二甲基亚砜(DMSO)、二喹啉甲酸(BCA)试剂盒、磷酸盐缓冲液(PBS)购自Sigma公司；Trizol试剂、聚偏氟乙烯(PVDF)膜、电化学发光(ECL)、双荧光素酶报告基因检测试剂盒购自北京Solarbio公司；……