miR-181c-5p通过靶向NDRG2调节人胶质母细胞瘤生物学活性

王铁峰 王刚 牛占峰

(1海南省第二人民医院神经外科，海南 五指山 572299；2宁夏医科大学总医院神经外科)

人胶质母细胞瘤是常见的人脑内原发性恶性肿瘤，具有极高的发病率和死亡率〔1〕。当前已有多种能够治疗胶质瘤的方法，如药物治疗、手术治疗等，但仍具有一定的缺陷性，治疗效果不佳〔2，3〕。MicroRNA是一种广泛分布的内源性非编码蛋白质的小RNAs(约为22个核苷酸)，其特点是可以结合到mRNA的3′UTR端来发挥其负调控基因表达的作用〔4〕。现已证实，miRNA与肿瘤的发生发展具有紧密联系〔5〕。已有研究表明，miRNA在胶质瘤细胞中具有差异性表达，并在细胞的增殖、迁移、凋亡中扮演重要角色。miR-128通过靶向ARP5/Bmi-1/E2F-3a从而调节胶质母细胞瘤的增殖〔6〕。miR-328通过靶向ABCG2降低胶质母细胞瘤的耐药性〔7〕。miR-125a-5p通过靶向TAZ可抑制胶质母细胞瘤增殖并促进其进行分化〔8〕。miR-181c-5p也是miRNA家族中的一员，已有研究发现miR-181c-5p在多种疾病的发生中具有重要作用，LncRNA可通过miR-181c-5p竞争性结合从而调控巨噬细胞自噬〔9〕。miR-181c-5p通过调控白血病抑制因子从而调控高糖介导的人脐静脉内皮细胞功能障碍〔10〕。miR-181c-5p通过靶向SMAD7调节神经母细胞瘤的生物学活性〔11〕。但miR-181c-5p在胶质母细胞瘤中的表达及其调控机制目前还不清楚。本研究拟分析miR-181c-5p在胶质瘤细胞中的表达及对其生物学活性的影响。

1 材料与方法

1.1材料 人胶质母细胞瘤细胞系U87购于美国ATCC公司；细胞培养基DMEM、胎牛血清(FBS)、胰蛋白酶均购于Sigma；脂质体转染试剂Lipofectamine 2000购于Invitrogen公司；Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒购于凯基生物科技公司；逆转录试剂盒、荧光定量PCR检测试剂盒购于大连宝生物工程有限公司；……