庞金兰
(贵州省毕节市黔西县动物疫病预防控制中心 551500)
金兰镇一养牛户于2020年9月底从山东省临沂市购买5~18月龄鲁西黄牛129头,价值85万元,因长途运输受寒,加之气候、水土、草料不适,一周内65头肉牛发病,出现感冒、肺炎、肠炎等病混合感染,已死亡2头。
病牛咳嗽、鼻孔一侧或两侧流浓鼻液、眼部少量分泌物,部分牛体温升高、食欲不振、流涎。
病理变化主要集中在肺部与胸腔。肺和胸膜轻度粘连,肺脏实变,呈菜花样,切面呈大理石样,有不规则坏死病灶;胸腔积液;心包积液;肾脏水肿;脑内积液,有脓性液体在脑右侧。
采集1头患病牛病变肺组织、肺门淋巴结、胸腔积液、心包积液各1份。
取病变肺组织与肺门淋巴结无菌研磨成匀浆后,与胸腔积液及心包积液反复冻融以用SDS-Protein K法提取DNA,以针对牛传染性胸膜肺炎病原特异性引物SC1/SC2,对上述DNA样本进行PCR扩增[1],结果见图1。
由图1可知,未从送检胸腔积液、心包积液、肺组织与肺门淋巴结中以牛传染性胸膜肺炎病原特异性引物SC1/SC2未扩增到277bp目的条带,牛传染性胸膜肺炎病原核酸检出率为0(0/4),表明该牛未患牛传染性胸膜肺炎[2]。

图1 PCR核酸检测结果
取病变肺组织与肺门淋巴结无菌研磨成匀浆后,与胸腔积液及心包积液反复冻融以用SDS-Protein K法提取DNA,以针对牛支原体肺炎病原通用引物16SP1/16SP2,对上述DNA样本进行PCR扩增,结果见图2。……