R406抑制脂多糖诱导的RAW264.7细胞炎症及其机制研究

林 杰， 张 波

(同济大学附属东方医院医学超声科，上海 200120)

炎症反应是机体受到内外界有害刺激时产生的一种防御性反应，是一种常见且重要的生理反应[1]。炎症反应是机体抵御外界感染的基本反应，但炎症反应过度会造成机体损伤。炎症反应与多种疾病的发生和发展密切相关，比如动脉粥样硬化、肿瘤、关节炎、炎症性肠病等。炎症性疾病的发生发展与巨噬细胞的分化以及表达分泌的炎症因子和介质有着密切关系,调节巨噬细胞的炎性活化，为炎症性疾病提供治疗的新方案。

脾酪氨酸激酶(spleen tyrosine kinase, Syk)表达于各类细胞，包括巨噬细胞、肥大细胞等。作为细胞内的一个信号转导分子，Syk广泛参与调节机体的免疫应答和炎症反应[2]。相关研究表明，巨噬细胞表面受到相关抗原刺激后，信号分子激活Syk，使其磷酸化，磷酸化的Syk激活下游因子，促进炎症因子的表达和分泌[3]。因此，抑制Syk的激活，可以成为抑制炎症方法之一。R406是一种小分子抑制剂，能抑制Syk底物接头磷酸化，阻断Syk依赖的免疫细胞活化，并减少免疫复合物介导的炎症[4]。可见，R406能通过抑制Syk的信号传递，抑制下游炎症因子的表达。本研究利用脂多糖(lipopolysaccharide, LPS, 50 ng/mL)刺激RAW264.7(单核巨噬细胞)分化为炎性细胞，分泌各类炎症因子，构建体外炎症模型，检测R406对炎症因子的分泌以及相关基因表达的影响，探究R406的抗炎作用及其机制。

1 材料和方法

1.1 材料

RAW264.7(KG097)购自圆创生物科技(上海)；R406(HY-11108)购自美国MedChemExpress公司；胎牛血清(fetal bovine serum, FBS； 10100147)购自Gibco(澳大利亚)；DMEM培养基(dulbecco’s modi-fied Eagle’s medium, DMEM； SH30022.01)和双抗(链霉素+青霉素,SV30010)购自上海北诺生物科技有限公司；……