miR-138调控Notch-1信号通路对脑胶质瘤细胞增殖与分化作用及其机制研究

吕 尧，戴伟民，揭园庆，余国峰

(衢州市人民医院 神经外科，浙江 衢州 324000)

脑胶质瘤是常见的颅内恶性肿瘤，主要治疗方式包括外科手术和放化疗[1-2]。微小RNA(micro RNA， miRNA)可调控蛋白编码，影响蛋白表达，在许多信号通路中起到关键作用[3]。近年来研究发现miRNAs在脑胶质瘤患者和脑组织正常人群中的表达具有差异性。李会兵等[4]认为miR-138异常表达可影响脑胶质瘤细胞增殖、侵袭以及凋亡，梁燕等[5]认为Notch-1信号通路活化可促进脑胶质瘤细胞增殖与分化。本研究观察脑胶质瘤患者miR-138和Notch-1信号通路相关蛋白表达情况，观察miR-138表达水平对人脑胶质瘤细胞株U-87 MG Notch-1信号通路相关蛋白表达的影响，探讨miR-138在脑胶质瘤中的可能作用机制。

1 资料与方法

1.1 试剂与材料 人脑胶质瘤细胞株U-87 MG购自上海素尔生物科技有限公司，miR-138转染试剂购自上海吉玛公司，Trizol试剂、PVDF膜、U6内参检测试剂盒购自Invitrogen公司，2 000 bp DNA marker购自郑州实验器材有限公司，牛血清蛋白(BSA)购自Hyclone公司，胎牛血清(FBS)、CCK 8试剂盒购自Gibco公司，miRNA荧光定量PCR试剂盒购自Stratagene Crop公司。倒置显微镜购自日本Olympus公司，高速离心机购自德国Eppendrof公司，荧光定量PCR仪(7500Fast)购自美国ABI公司。

1.2 研究对象一般资料 2018年1月—2019年1月于衢州市人民医院收集18例鉴定为脑胶质瘤患者的脑组织活检标本和5例神经外科脑外伤手术患者的正常脑组织活检标本，采集标本前均获得患者或家属知情同意，本研究获得医院伦理委员会批准。脑胶质瘤患者平均年龄(52.33±13.42)岁，男12例、女6例， WHO分级：I级5例、Ⅱ级6例、Ⅲ级7例，病理学类型：星形细胞瘤11例、间变少突胶质细胞瘤4例、间变星形细胞瘤3例。……