Bax抑制因子1可抑制体外培养的大鼠血管平滑肌细胞的钙化

陈韦任，杨 霞，周玉杰，马 茜，吴雪萍，沙 媛，钱 赓

1首都医科大学附属北京安贞医院心内12病房，北京市心肺血管疾病研究所，冠心病精准治疗北京市重点实验室，北京 100029；中国人民解放军总医院2第二医学中心心血管内科，3第一医学中心心血管内科，北京100853

血管钙化是动脉粥样硬化、糖尿病、终末期肾病等多种疾病的病理生理基础，它可以导致动脉粥样硬化斑块破裂、血栓形成等严重后果，是心血管疾病的重要危险因素［1-3］。血管钙化主要表现为血管硬度增加和顺应性下降，其机制和骨发育相似，是主动的、可以调节的过程［4-6］。研究发现血管钙化机制包括细胞凋亡、血管平滑肌细胞（VSMC）由收缩型向成骨样细胞表型分化、钙磷沉积、氧化应激等［7-11］。Bax抑制因子-1（BI-1）是抑制程序性坏死信号通路的关键性调节因子［12-14］。最新研究证实BI-1和心血管疾病密切相关［15-17］。心肌缺血再灌注损伤中，BI-1表达降低，细胞凋亡增加，而激活BI-1能下调线粒体分裂蛋白表达，保护线粒体结构和功能，抑制氧化应激和细胞凋亡，减轻再灌注损伤［18］。BI-1对血管钙化的具体作用目前尚不清楚。本研究通过建立VSMC钙化模型，观察钙化时BI-1的表达和BI-1对钙磷沉积、VSMC骨型分化和细胞凋亡的作用，为临床研究提供实验依据。

1 材料和方法

1.1 材料

雄性SD大鼠30只（中国人民解放军总医院动物试验中心提供），4周龄，体质量80～100 g；主要试剂：β磷酸甘油；氯化钙；磷酸盐缓冲液（PBS）；胎牛血清（Hyclone）；DMEM（Gibco）；茜素红S染色试剂盒、碱性磷酸酶试剂盒（Sigma）；钙测定试剂盒（北京中生北控生物公司）；……