瘤胃细菌的分离培养研究进展

严慧 胡文悦 宋晓晴 纪守坤 刘萱 黄卓涵 刘月琴 张英杰

（河北农业大学动物科技学院，保定 071000）

反刍动物的瘤胃被认为是纤维素物质降解效率最高的天然场所之一，瘤胃微生物资源的开发已受到国内外研究者半个多世纪的关注［1］。随着二代高通量测序技术的应用，越来越多未培养微生物被揭开面纱，瘤胃微生物群落型态与动物的健康［2］和生产性能［3］息息相关。随着微生物组学的发展，越来越多的“不可培养微生物”被揭开面纱，但“不可培养”也成为其应用的阻碍。因此，对提高饲料消化效率、降低腹泻、降解毒素等菌种资源的开发利用，再度成为近些年的研究热点。自瘤胃厌氧培养技术发展以来，国内外用于瘤胃细菌培养的方法多种多样，因此，本文将针对国内外自瘤胃菌群厌氧培养技术发展以来的相关报道，围绕瘤胃细菌的分离培养步骤及特定功能菌的分离培养方法做一综述。

1 瘤胃细菌分离的基本流程

1.1 瘤胃液采集

动物屠宰后，将瘤胃剖开采集瘤胃液；对于安装有瘤胃瘘管的动物，可从瘘管口处采集瘤胃内容物［4］。另外，瘤胃液也可以采用从口腔［5］插入瘤胃管的方式采集，采样管的插入深度影响所采集瘤胃液的微生物发酵能力，对于奶牛来说，插入200 cm能够采集到瘤胃中央的样品，最具代表性，pH、VFA、氨态氮、离子浓度与通过瘤胃瘘管采集的样品无显著差异，180 cm插入深度采集的样品VFA、钙、磷、钾浓度显著偏低［6］。成年牛羊分别有不同尺寸的不锈钢瘤胃管，犊牛可使用成年羊的不锈钢瘤胃管，另外也可使用不同尺寸的硬质PVC管（Polyvinylchlorid，主要成分为聚氯乙烯）采集瘤胃液［7］，PVC管法同样适用于新生羔羊。……