申美伦,张 宇,马相影,张志恒,李柔茜,金箫迪,高 利
(东北农业大学动物医学学院/黑龙江实验动物与比较医学重点实验室,黑龙江哈尔滨 150030)
一氧化氮(nitric oxide,NO)作为一种信号分子,能够在细胞内起到重要作用而被广泛应用。而一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)催化后可产生NO。NO可激活环磷酸鸟苷(guanosine 3′,5′-cyclic phosphate,cGMP),能够传递细胞间信号[1]。静松灵作为二甲苯胺噻嗪类似物,是一种α2肾上腺受体激动剂,该药物的麻醉作用对信号转导系统有显著的影响[2]。静松灵在很多种类动物上都能产生明显的镇痛、镇静和麻醉作用。NO/cGMP信号转导系统可使麻醉药对神经产生突触作用,从而产生镇痛和麻醉效果[3-5]。因此,通过研究了解静松灵发挥作用与NO-cGMP信号系统等中枢信号系统之间关系有重要意义。试验设计研究静松灵对小型猪麻醉的主要作用脑区中NO、NOS和cGMP变化,拟从小型猪中枢神经细胞信号转导系统的变化探讨静松灵麻醉作用的分子机理。
1.1.1 试验用动物 巴马小型猪20头,8月龄~9月龄,雌雄兼用,体重30 kg±5 kg,健康状态良好。
1.1.2 试验药品与试剂 静松灵原粉(纯度大于99.5%),东北农业大学动物医学学院外科实验室提供;NOS、NO、考马斯亮蓝蛋白质测定试剂盒,南京建成生物工程研究所产品;猪cGMP测定试剂盒,中国卡尔文生物科技有限公司产品。
1.1.3 主要仪器设备 Datex-OhmedaS/5TM型重症监护仪,芬兰Datex-Ohmeda公司产品;IntelliVue MP20监护仪,荷兰Philips公司产品;Sigma 3-30K型高速低温离心机,德国Sartorius公司产品;普通离心机,上海安亭科学仪器厂产品;HH数显恒温水浴锅,河南星宇航天航空仪器厂产品;……