菊黄东方鲀卵黄蛋白原肽段vWD的真核重组表达及功能研究

蒋彩云 ，乔 琨，许 旻，陈 贝，刘智禹,3，黄文树,3

( 1.集美大学水产学院，福建 厦门 361021；2.福建省水产研究所，福建省海洋生物增养殖与高值化利用重点实验室，福建 厦门 361013；3.福建省海洋生物资源开发利用协同创新中心，福建 厦门 361021)

0 引言

大多数的河鲀都含有河豚毒素(tetraodotoxin,TTX)，TTX是一类毒性极强的非蛋白类神经毒素[1]，它可以选择性地与肌肉和神经组织中的电压门控Na+通道结合，从而封闭神经轴突传导能力，导致进行性瘫痪，甚至使生物因呼吸和心力衰竭而死亡[2]。TTX对小鼠的半数致死量(LD50)约为8 μg/kg(按小鼠体重计)，对人的最小致死剂量只有0.5～1.0 mg[3]，其毒性是氰化钠的1 250倍[4]，但目前还没有对TTX中毒治疗的特效药。由于河鲀肉味鲜美、营养丰富，日本、澳大利亚、孟加拉国、中国素有食用河鲀的习惯；然而，TTX的化学性质稳定，一般烹调手段难以破坏[5]；因此，人们因食用河鲀而导致TTX中毒的事件，屡有发生，严重威胁人们的生命安全[6-8]。

四齿鲀科的许多河鲀都可以贮积TTX。野生河鲀可通过食物链的毒素富集作用，大量贮积TTX于特定组织，如肝脏、卵巢和皮肤等[9]。养殖的无毒的红鳍东方鲀(Takifugurubripes)和星点东方鲀(Takifuguniphobles)，若饲喂含TTX的饵料后，其肝脏、卵巢和皮肤中也可累积TTX[10-11]。对野生斑点东方鲀(Takifugupoecilonotus)进行研究发现，在性成熟期(12月至3月)，随着性腺指数(gonadosomatic index,GSI)的升高，卵巢中的TTX毒性含量增加，与此同时，肝脏中的TTX含量显著降低[12]，提示河鲀体内的TTX可通过组织间转运从肝脏转移到卵巢。为了探究TTX组织间转运机制，Yin等[13]提取和纯化了豹纹东方鲀(Takifugupardalis)卵巢……