Endiandrin A对嗅鞘细胞活力的研究

钱然

摘要：嗅鞘细胞是嗅觉系统的胶质细胞，它是脊髓损伤后进行神经修复治疗的一种有前途的方法。嗅鞘细胞分泌神经因子的浓度不同，会对嗅鞘细胞体外存活率有影响，我们评估了不同浓度神经因子对嗅鞘细胞活力的影响，并用化合物Endiandrin A（End A）对嗅鞘细胞进行活力影响的评估，以确定它是否能在神经因子的存在下存活。我们发现，End A能在神经因子的存在下，显著地提高嗅鞘细胞的存活，这些结果首次证明End A能调节嗅胶质细胞，从而有利于神经修复，从而改善移植后的生存。

关键词：嗅鞘细胞;神经因子;脊髓损伤

脊髓损伤（spinal cord injury，SCI）后神经细胞遭到破坏，神经功能恢复困难，如果早期治疗不当，功能改善往往不如人意。而嗅鞘细胞（olfactory ensheathing cells，OECs） 移植被认为是治疗SCI最有希望的方法[1]。研究发现[2]，嗅上皮干细胞可以产生新的神经因子，能使鼻和脑重新建立联系。本文主要评估化合物End A对OECs活力的影响，以确定它在神经因子的存在下，OECs最强活力时的最佳浓度。

1.材料和方法

1.1 OECs培养

小鼠的OECs在含有10%胎牛血清、G5补充剂、庆大霉素、L-谷氨酰胺和5%CO2的DMEM培养基中培养一周，再重新移植进行分析。

1.2 Endiandrin A

由Endiandra Domin的分离物质End A（A末端）由澳大利亚布里斯班格里菲斯大学Eskitis研究所提供，分子式为C20H24O4。在DMSO中制备10Mm的储备溶液，将储备溶液在培养基中稀释至0.1至10μM的浓度。

1.3 MTS检测细胞活力

用cellTiter 96水溶液试剂MTS法测定细胞活力和增殖。简言之，将OECs以1.5x104细胞的密度接种于96孔板中，使细胞粘附过夜。将A末端和甲基普雷德尼松酮以不同浓度（0.1-10μM）添加到96孔中，孵育24小时[3]。……