人参皂甙Rg3下调树突状细胞IDO杀伤小鼠肾癌细胞的实验研究

黄艳琴，袁佳蕾，余艳容，彭珊珊，张 咏，郭红燕，胡银英

(1.江西省医学科学院抗肿瘤研究室； 2.江西省中医药大学附属医院肾内科，南昌330006)

树突状细胞(DC)是专职的抗原提呈细胞,IDO在其内的表达可抑制DC的表型和功能，主要表现为对细胞因子的反应降低,进而抑制T细胞的免疫反应[1]。传统的体外修饰DC的抗肿瘤疫苗通常采用肿瘤实体抗原、合成的肿瘤抗原致敏DC，以及肿瘤相关基因修饰DC，其虽有一定的抗肿瘤作用，但依然存在不足，如DC功能障碍、DC无能等[2]。因此，提高DC抗肿瘤的能力，完善DC疫苗的治疗效果是学者们共同关心的热点。人参皂苷Rg3是一种已被确认具有明显抗肿瘤作用的人参活性单体成分[3]。本研究采用人参皂苷Rg3作用小鼠肾癌RAG细胞株裂解物致敏的DC，探讨人参皂苷Rg3增强DC的抗原提呈能力，以及激活CTL抗肿瘤的作用机制。

1 材料与方法

1.1 动物与试剂

SPF级别C57BL/6小鼠，雄性，体重16～18 g，周龄6～8周，SPF级别BALB/C小鼠，雄性，体重16～18 g，周龄6～8周，购自湖南长沙斯莱克实验动物有限责任公司；小鼠肾癌细胞RAG细胞株，购自中国科学院细胞库。人参皂甙Rg3纯度>99%购自大连福生制药厂。

1.2 实验方法

1.2.1 DC的诱导与培养

将C57小鼠脱颈椎处死，浸泡于碘伏液消毒5 min；无菌状态下取双侧股骨，离断骺端，用注射针头破坏骨小梁后用无血清1640液反复抽吸冲洗髓腔，收集骨髓悬液，用0.5 mL红细胞裂解液重悬破坏红细胞，室温下静置5 min,加无血清1640稀释，离心洗涤2遍，弃上清，用10%FBSRPMI1640±20 ng·mL-1、GM-CSF±20 ng·mL-1IL-4 DC诱导培养体系重悬细胞，分别加入Rg3，进行实验分组，隔天进行半量换液。