方 平,王 娅,吴 迪,赵 婧
(1.川北医学院,四川 南充 637100 2.川北医学院附属医院儿科,四川 南充 637000)
呼吸机相关性肺炎(VAP)是一种常见的医院获得性感染疾病,具有高发病率和高死亡率。目前,支气管肺泡灌洗(BAL)是医院诊断VAP并指导治疗的常用方案[1]。近年来,VAP经常在新生儿机械通气治疗后出现,严重影响新生儿治疗效果及安全。有相关文献显示,VAP是新生儿重症监护室中仅次于败血症的第二大院内感染性疾病[2]。因此明确新生儿VAP进展情况并及时采取合理有效的治疗措施是提高新生儿VAP存活率的关键。因为目前关于影响新生儿VAP发病因素的研究很少,所以本研究通过构建新生VAP小鼠模型,研究和肽素(Copeptin)、IL-32、IL-17水平变化与VAP发病因素的关系,为新生儿VAP在临床上的诊断提供更可靠的参考依据。
1.1实验材料:实验动物:SPF级BALB/c小鼠,4周龄,雄性,体重(18±2)g,由成都达硕实验动物有限公司提供,生产许可证号:SCXK(川)2015-030,使用许可证号:SYXK(川)2014-189。实验细菌:铜绿假单胞菌,菌种编号:CCTCC AB 200053,来源:中国典型培养物保藏中心。实验试剂:Copeptin、IL-32、IL-17 Elisa测定试剂盒购于上海茁彩生物科技有限公司,NF-κB、TLR2与TLR4抗体购于艾博抗(上海)贸易有限公司。实验仪器:MD3000小动物肺功能测定仪(安徽正华生物仪器设备有限公司);RM2235切片机(德国徕卡公司);Multiskan Sky酶标仪(美国ThermoFisher仪器有限公司);BX43光学显微镜(日本Olympus公司)。
1.2方 法
1.2.1实验分组及构建VAP小鼠模型:取健康BALB/c雌性小鼠54只,随机分为空白组、轻症组(1×106cfu/L菌液)、重症组(6×106cfu/L菌液),每组18只,适应性喂养一周后进行实验。除空白组外,其余各……