金黄色葡萄球菌基因检测及耐药性分析*

王 欢,胡 垚,陆惠慧,秦玲莎,赵贵芳,齐 玲,徐令清

广州医科大学附属第六医院/广东省清远市人民医院临床生物样本库，广东清远 511518

2019年清远地区细菌耐药监测报告显示金黄色葡萄球菌(SA)占本地区革兰阳性菌分离率的第一位，其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)占多重耐药菌检出率的32.6%,耐药菌是院内外感染的重要病原菌之一，是世界范围内耐药性监测的重点对象，其流行是一个严重的临床医学及公共卫生问题[1-2]。本研究对本院临床分离的80株非重复SA进行耐药性分析及基因检测，为临床合理治疗提供参考依据。

1 材料与方法

1.1菌株来源 收集从2018年7月至2019年7月清远市人民医院检验科临床检测分离到的SA菌株，菌株均来自不同科室患者的临床标本，包括脓液、血液、穿刺液、痰液、引流液等，剔除出重复菌株，最后纳入研究的SA共80株。SA质控菌株：ATCC25923，ATCC29213，ATCC43300。

1.2仪器与试剂 仪器：BD PhoenixTM100全自动细菌鉴定药敏系统、复合鉴定板及相关配套试剂均为美国BD公司产品，生物安全柜ESCO LA2-4A1来自新加坡艺思高科技有限公司，基因扩增仪Bio-Rad T100、电泳仪、凝胶成像仪Bio-Rad ChemiDoc MP均来自美国伯乐公司，微量移液器Eppendorf来自德国艾本德公司。试剂：血琼脂培养基购自广州迪景微生物科技有限公司； TaqPCRMaster Mix试剂、MarkerⅡDNA Ladder、核酸染料GelRed等均为北京天根生化科技有限公司产品。

1.3方法

1.3.1SA鉴定及药敏试验 试验菌株经哥伦比亚血琼脂培养基培养后，挑取单个菌落，经革兰染色和触酶试验证实后，用传统画线法接种于血琼脂培养基上进行分离纯化，用PhoenixTM100全自动微生物鉴定和药敏试验系统以及纸片扩散法鉴定细菌并进行药敏检测，鉴定后的菌株保存于-80 ℃冰箱备用。……