高 颖,李蕊蕊,陈媛媛
黑龙江八一农垦大学,黑龙江大庆 163319
黄曲霉毒素(AF)是主要由黄曲霉和寄生曲霉产生的一种次级代谢产物,广泛存在于自然界中。AFB1的代谢与湿度、温度、氧化应激、生长基质、储存材料和阳光等密切相关。黄曲霉毒素毒性相当于氰化钾的10倍,砒霜的68倍,于1993年被划为一类致癌物,黄曲霉毒素可以引起免疫抑制、致癌、致畸、致突变性。猪摄食AFB1污染饲料会出现采食量减少、体重降低、肝和免疫功能受损,以及血清生化指标的改变,免疫系统由于AFT中毒而遭受严重破坏,细胞免疫应答延迟,促炎细胞因IL-6、IFN-γ和IL-10高表达。本试验以6周龄健康昆明小鼠为试验对象,观察比较慢性与急性AFB1中毒对小鼠的影响。
AFB1标准品购自FERMENTEK公司,AFB1粉末用DMSO溶解为1 mg/mL的储备液备用。
6周龄健康雄性昆明小鼠40只,随机分为空白对照组、DMSO溶剂对照组、AFB1慢性中毒组、AFB1急性中毒组。慢性AFB1组和急性AFB1组小鼠分别经口灌服AFB1溶液(300 µg/kg,2 mg/kg),空白对照组和溶剂对照组分别经口灌服相同体积的生理盐水和DMSO溶液(300 µL/kg)。试验动物饲喂标准饲粮,自由采食饮水。急性AFB1组实验期1周,其它组小鼠试验期为8周。实验结束,小鼠禁食12 h以上。第2天经眼眶采血收集血液,颈部脱臼处死小鼠,血样用4 ℃离心机4 000 r/min 离心10 min收取上清液,血清用ELISA检测。解剖小鼠迅速取其肝脏,生理盐水冲洗并用滤纸吸干后,电子天平称量净重。
脏器指数=(脏器净重/宰前体重)×100%
用酶标仪测量血清中IL-1β,IL-2,IL-6,IL-8,IL-10,TNF-α,INF-γ的值。以上炎性因子指标均使用ELISA(朗顿,上海)试剂盒测定。……