甲基紫显色法研究几种常见中药成分的抗氧化自由基活性及其机理*

郭新颖，顾 俊，陈 峰，戴志英，杨梅桂

（南通市疾病预防控制中心 理化科，江苏 南通226007）

羟自由基（hydroxyl free radical，·OH）是机体中活性氧的一种，它不仅是维持正常生命过程的必需物质，还是杀死红细胞、降解DNA、细胞膜和多糖化合物的元凶[1-3]。作为生物体的破坏者，在体内自由基失衡的非正常的生理水平上，·OH通过攻击生物大分子导致组织细胞损伤，从而引起人类的各种疾病[4-6]。因此，为清除体内多余自由基，国内外已将具有抗氧化成分的天然与合成类抗氧化剂的研究开发作为主要方向，尤其是对中药进行了大量研究[7-10]。本文从中药提取物的的清除·OH的能力作为其主要抗氧化指标，以甲基紫（methyl violet，MV）作为显色剂，结合分光光度法的试验方法进行了中药清除·OH作用的初步研究，对可能产生的反应机理进行了分析探讨，以期对中药进行体外抗氧化活性相关研究提供参考。

1 实验部分

1.1 仪器与设备

UNICO7200型分光光度计（上海分析仪器厂）；FA2004型电子天平（上海良平仪器仪表有限公司）；CS501超级恒温槽（重庆实验设备厂）；PHS-3CpH计（上海仪电科学仪器股份有限公司）；量筒、称量纸、玻璃搅拌棒、药品勺、试剂瓶若干。

1.2 材料与试剂

甲基紫（5.15×10-5mol·L-1），FeSO4（1.5×10-4mol·L-1），H2O2（0.3%），Na2HPO4,柠檬酸，H3PO4，均为分析纯，购自国药集团化学试剂有限公司；中药为市售。

Na2HPO4-柠檬酸缓冲液配制9.35mL 0.2mol·L-1Na2HPO4和10.65mL 0.1mol·L-1柠檬酸混合，HCl精确调至pH值为4.5。

1.3 试验原理

Fenton试剂反应是目前已知的产生·OH的经典方法，·OH是在整个反应中起主要氧化作用的物质，它与有机染料如染色剂、显色剂、荧光剂、抗氧化剂等反应的主要途径是夺取氢原子、发生电子转移以及产生加成反应的过程。……