针刺治疗对膀胱过度活动症大鼠膀胱功能及膀胱黏膜组织P2X3蛋白表达的影响

王丽娟 冯琦钒 程亚伟 丁一 陈磊

(海南省中医院，海南 海口 570203)

膀胱过度活动症(OAB)是一种膀胱功能障碍综合征，在2002年国际尿控协会(ICS)正式提出这一概念，其主要以尿急症状为特征，伴有或不伴有尿失禁，通常还表现为白天尿频和夜尿症〔1〕。有研究〔2〕表明，膀胱黏膜组织配体门控性非选择性阳离子通道受体(P2X)3蛋白的表达能够影响膀胱节膀胱逼尿肌等相关功能和OAB疾病的发生。针刺在治疗OAB中已有过应用，并且有一定的治疗效果。本研究即采用针刺中髎穴、次髎穴治疗膀胱过度活动症大鼠，探究其对大鼠膀胱功能及膀胱黏膜组织P2X3蛋白表达的影响，为今后有关针刺治疗OAB研究提供参考依据。

1 材料与方法

1.1实验动物及分组 30只SD雄性大鼠，2～3月龄，体重220～240 g。采用12 h恒定昼夜交替光照，相对湿度50%～70%，温度22～26℃的饲养条件，自由饮食饮水，适应性饲养1 w后，将30只大鼠按随机数字表法分为3组：对照组、模型组、针刺组，每组10只。在整个实验过程中对动物的处置均遵照中华人民共和国科技部2006年颁布的《关于善待实验动物的指导性意见》中的相关条款。

1.2主要仪器和试剂 Spike8.0数据采集分析系统购自上海骐驰有限公司;Warner差分放大器DP-301 ADInstruments公司；RNA提取试剂Trizol、RNA逆转录试剂盒、SYBR@Green RT-PCR试剂盒均购自美国Sigma-Aldrich公司；P2X3单克隆抗体(货号：PA5-30894)及相应二抗均购自赛默飞世尔科技(中国)有限公司。

1.3建立膀胱过度活动症大鼠模型 参照文献〔3〕的方法，对模型组与针刺组的大鼠采用近端尿道结扎法，建立膀胱流出道梗阻(BOO)诱导的OAB 模型。OAB模型建立的具体方法为：采用2%戊巴比妥钠(40 mg/kg)腹腔注射麻醉大鼠，仰卧位固定，常规消毒尿道口及四周。……