miR-491-5p靶向CCL22对舌鳞状细胞癌细胞增殖及凋亡的影响

汤丹萍 程志刚 邓少林

(武汉市中心医院口腔科，湖北 武汉 430000)

舌鳞状细胞癌是一种常见的头颈部恶性肿瘤，其新发病例逐年增加，威胁着人类的健康和生命〔1,2〕。趋化因子配体(CCL)22是趋化因子组的成员之一，也称为巨噬细胞来源的趋化因子(MDC)，由单核细胞和树突细胞表达〔3〕。它主要由单核细胞来源的M2巨噬细胞合成，属于CC族趋化因子，CCR4是CCL22的受体，在调节性T细胞(Tregs)和Th2细胞中表达，这在肿瘤治疗中有一定的潜力〔4〕。据报道，CCL22在肿瘤微环境中的表达通过影响M1和M2样巨噬细胞的平衡，导致舌鳞状细胞癌患者预后恶化〔5,6〕。CCL22对舌鳞状细胞癌细胞的细胞表型变化和肿瘤生长的影响尚未可知。miR-491-5p在多种癌症中均出现表达失调〔7～10〕，但是miR-491-5p与CCL22在舌鳞状细胞癌之间的关系尚未清楚。本研究旨在研究miR-491-5p对细胞增殖、凋亡的调控机制。

1 材料与方法

1.1材料 实验动物SPF级BALB/C裸鼠(18～20 g)30只，购自湖南斯莱克实验生物有限公司，遵守实验动物管理和伦理委员会章程对动物进行饲养和相关实验；人正常口腔角质细胞培养NHOK、人舌癌细胞TCA8113、UM1、SCC1均购自美国菌种保藏中心(ATCC)；杜氏培养基(DMEM)购自Gibco；胎牛血清购自Hyclone；噻唑蓝(MTT)购自上海克拉玛尔；LipofectamineTM2000购自北京宜科思源科技有限公司；二喹啉甲酸(BCA)蛋白定量试剂盒购自上海通蔚公司；逆转录试剂盒、聚偏氟乙烯(PVDF)膜购自Roche；十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) 试剂盒、膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶(Annexin V-FITC/PI)凋亡检测试剂盒均购自北京索莱宝公司；电化学发光(ECL)试剂盒购自北京普利莱基因技术公司；……