骨碎补总黄酮基于Notch信号通路改善骨质疏松的作用及机制

黄翔宇 林立垚 郝敏 刘凯

(1丽水学院，浙江 丽水 323000；2丽水市第二人民医院)

骨质疏松常表现为原发性类型，其特征为骨量减少、骨强度下降等骨组织显微结构变化，致使患者骨脆性增加，进而引发骨折等临床表现〔1〕。骨质疏松患者最常表现为腰背部的疼痛，进而可致全身骨骼疼痛或髋、膝及腕关节，对患者的生活质量产生严重影响〔2，3〕。骨碎补作为中医骨科常用的中药品种之一，具有活血续伤、补肾强骨的功效，且现代药理研究表明，其主要成分总黄酮(DMF)能够有效作用于骨质疏松患者，可维持其骨微结构的完整程度，并提升骨密度〔4〕。现阶段关于DMF对于骨质疏松患者的作用机制尚不明确，可能作用于Notch信号通路中，进而产生相应的连锁反应。本文旨在研究DMF对于骨质疏松的作用效果及机制。

1 材料与方法

1.1试剂 胎牛血清(以色列Biological Industries公司)、DMEM高糖培养液、DMEM/F12培养液、磷酸盐缓冲液(PBS)(美国Hyclone)、Ⅰ型胶原酶(美国Invitrogen公司)、红细胞裂解液(中国Solarbio公司)、Notch-1一抗、Hes-1一抗、GAPDH一抗(美国Cell Signaling Technology公司)、Trizol试剂盒、逆转录试剂盒、聚合酶链反应(PCR)扩增试剂盒(日本TaKaRa Bio公司)、肿瘤坏死因子(TNF)-α试剂盒、单核细胞趋化蛋白(MCP)-1试剂盒、白细胞介素(IL)-6试剂盒(上海中乔新舟公司)、二喹啉甲酸(BCA)蛋白浓度测定试剂盒(上海碧云天公司)及水合氯醛(成都科龙化工公司)。

1.2仪器 高速冷冻离心机(上海安亭公司，型号TGL-16G-A)、实时荧光定量PCR仪(美国Applied Bio公司，型号7300)、电子天平(上海特勒托多利多公司，型号EL204)、酶标仪(德国Thermo公司)、电泳仪(美国Beckman Coulter公司)、凝胶成像仪(美国Bio Rad提供)。

1.3药品 强骨胶囊(北京岐黄医药股份有限公司，国药准字Z20030007，主要成分为DMF，规格0.25 g/s)。……