辅助生殖技术中的阴道微生态及对妊娠结局的影响

黄丽萍

江西省妇幼保健院辅助生殖中心 (江西南昌 330006)

阴道微生态中优势菌群为乳酸杆菌，其通过对糖原产生影响，使后者出现无氧酵解，转变为乳酸，促使阴道的酸性环境得到保持，对病原菌产生抑制作用。当女性体内激素出现明显波动时，会使阴道内pH值发生明显变化，阴道内菌群平衡被打破，使阴道受到有害菌群入侵[1]。在为女性应用辅助生殖技术时，前期降调以及控制性超促排卵过程中，患者的雌激素水平会出现明显的波动，在快速降低后明显提升，由此可能导致患者阴道pH值出现明显改变，使阴道微生态的平衡被打破，导致下生殖道感染，但对于妊娠结局产生的影响目前尚无过多研究[2]。本研究选取接受体外受精-胚胎移植周期第1周期长方案控制性超促排卵患者120例为研究对象，探讨辅助生殖技术中的阴道微生态及对妊娠结局的影响，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2019年1月至2020年4月我院收治的120例不孕症患者为研究对象，年龄20～40岁；体质量指数18～30 kg/m2。纳入标准：由于输卵管原因导致的不孕；对研究内容知情同意。排除标准：生殖系统病变患者，如子宫肌瘤、生殖道畸形、子宫内膜异位症等；存在阴道菌群失调易感因素，如近期应用抗生素、免疫抑制剂，合并糖尿病等；下生殖道严重感染。按照随机数字表法，分为对照组与试验组，各60例。两组基线资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性，见表1。

表1 两组基线资料比较

1.2 方法

对照组接受传统治疗，月经规则患者阴道超声监测排卵，排卵后5 d开始降调，月经不规则患者月经来潮3 d后开始应用去氧孕烯炔雌醇片(Organon lreland Ltd公司生产，国药准字H20171176，规格 21 s)进行预处理，每天1片，服用16 d后开始进行降调；多囊卵巢综合征患者应用妈富隆片，将内分泌调整至正常后进入周期；降调时间≥14 d，达到降调标准，应用促性腺激素时达菲林降低至0.05；若患者的输卵管严重堵塞，则为其实施输卵管腹腔镜手术，对其妊娠成功率与妊娠结局进行观察。试验组接受辅助生殖技术治疗，包括：为患者实施促排治疗，在排卵日后第7 天开始，通过皮下注射的方式，应用促性腺激素(丽珠集团丽珠制药厂，国药准字H20132654，规格 5 000单位)，用量为5 000单位/d，在进行18 d充分调节后，为患者开展阴道超声以及性激素检查，当患者的子宫内膜厚度≤5 mm，LH≤5 mU/ml，卵泡刺激素(follicle stimulating hormone，FSH)≤5 mU/ml，E2≤50 pg/ml时，则可开始启动促性腺激素(gonadotropin，Gn)；当患者有直径达到18 mm的≥3个卵泡时，则可采用10 000 U人绒毛膜促性腺激素进行扳机，36 h后借助阴道超声，为患者实施穿刺取卵术治疗，在完成取卵操作后，依据精子情况或受精情况，应用体外受精/卵胞浆内单精子注射(in vitro fertilization-embryo transfer/intracytoplasmic sperm injection，IVF/ICSI)开展授精；取卵手术完成后3 d为患者开展胚胎移植。

在采集标本时，采用无菌刮板以及长棉签，通过患者阴道侧壁上1/3的位置对阴道分泌物进行采集，实施2次阴道分泌物检查操作，首次检查的时间为进入体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization-embryo transfer，IVF-ET)周期前一周期卵泡中晚期，另一次检查的时间为人绒毛膜促性腺激素注射当天阴道冲洗前。全部患者均在人绒毛膜促性腺激素注射当天早晨，采集肘静脉血 5 ml，实施雌激素水平检测。

1.3 临床评价

(1)两组妊娠结局情况，为患者开展血β-人绒毛膜促性腺激素水平检测，若>10 mU/ml则可判定为生化妊娠；在将胚胎进行移植后的30 d，为患者开展阴道超声检查，若可探及孕囊，则可判定为临床妊娠；精子和卵子结合形成受精卵，受精卵着床至子宫内膜上生长发育，则为种植；妊娠不足28周、胎儿体重不足1 000 g而终止妊娠者称流产；妊娠满28周及以上，娩出后有心跳、呼吸、脐带搏动、随意肌收缩4项生命体征之一则为活产[4]。(2)两组治疗后阴道微生态与菌群情况，采集阴道分泌物标本，显微镜下检查真菌与滴虫情况，并开展Gram染色，实施微生态评价，包括菌群密集度、多样性、优势菌(数量最多的微生物)、中外阴阴道念珠菌病(vulvovaginal candidiasis，VVC)(有假菌丝存在则可确诊)、细菌性阴道炎(bacterial vaginitis，BV)(nugent评分>7分则可确诊)，同时对阴道分泌物pH值与阴道微生物功能进行检测[3]；微生态失调情况：阴道微生物的密集度、优势菌、多样性、菌群功能、炎性反应，有一项发生异常情况，则可诊断为微生态失调。

1.4 统计学处理

采用SPSS 23.0统计软件进行数据分析，计数资料以率表示，采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组妊娠结局比较

试验组生化妊娠率、临床妊娠率、种植率、活产率均高于对照组，流产率低于对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表2 两组妊娠结局比较[例(%)]

2.2 两组治疗后阴道微生态与菌群情况

试验组阴道微生态失调率明显高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)；两组BV、BV中间型与VVC发生率比较，差异无统计学意义(P>0.05)，见表3。

表3 两组治疗后阴道微生态与菌群情况[例(%)]

3 讨论

阴道微生态是衡量女性生殖健康的重要指标，涉及阴道炎症、早期妊娠维持、子宫内膜容受性、持续生育力等方面。临床认为，在女性阴道以及子宫内均可检测出微生物群落，在正常情况下，阴道内的微生态处于动态平衡状态，呈酸性环境，可对病菌繁殖起到抑制作用。但当平衡状态被打破时，会导致病变，影响生殖系统功能。辅助生殖技术主要是通过实施促排治疗，使患者自身的条件得到调节，从而为胚胎的生长发育提供良好的环境。此外，通过使用雌激素，可加快卵巢卵子排出。但也有研究发现，辅助生殖技术促进妊娠后，流产率也处于较高的水平，而阴道微生态失衡是导致流产发生的主要原因[5]。本研究结果显示，试验组阴道微生态失调率明显高于对照组(P<0.05)，表明辅助生殖技术的应用易导致患者阴道微生态平衡被打破，与既往研究报道相符[6]。其原因为，辅助生殖技术应用的降调药物以及控制性超促排卵均可使女性身体雌激素分泌紊乱，破坏阴道微生态平衡。

有研究报道称，细菌性阴道炎的出现，会降低女性妊娠率，提高流产风险，其认为细菌性阴道炎感染会引发亚临床子宫内膜炎，进而提高流产率[7]。但也有研究报道称，下生殖感染和辅助生殖结局之间无明显相关性[8]。本研究结果显示，试验组生化妊娠率、临床妊娠率、种植率、活产率均高于对照组，流产率低于对照组，表明辅助生殖技术可有效提升不孕症患者的妊娠率，阴道微生态失衡并未对患者的妊娠率产生明显影响。但临床工作中仍需重视阴道微生态失调可能对辅助生殖技术产生的不良影响。

综上所述，控制性超促排卵可导致阴道微生态失调，可能影响妊娠结局，可在人绒毛膜促性腺激素日对患者实施二次阴道微生态检查，同时做好各项干预工作，促使患者妊娠结局改善。