人脐带间充质干细胞对宫颈癌HeLa 细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制

王 琛,田 君,程海玲

（河南大学淮河医院妇科,河南 开封 475000）

人脐带间充质干细胞（mesenchymal stem cells，MSCs）是源自中胚层的一种多潜能干细胞，具有体外易扩增、取材方便和容易导入外源基因等优点，因而被作为天然的基因和细胞治疗的种子来源，在组织工程和再生医学中均具有重要价值［1-2］。MSCs 本身有迁移特点，可向肿瘤组织趋化和迁移，是肿瘤靶向治疗理想载体，因而分析MSCs 对于肿瘤细胞生物学特征的影响十分必要［3］。宫颈癌作为妇科最常见的恶性肿瘤，其病死率位居妇科肿瘤的前列，且目前尚无特效疗法。有学者主张发挥MSCs 亚全能分化潜能，通过旁分泌机制，调控宫颈癌细胞生物学活性，为宫颈癌基因治疗开辟新道路［4-5］。然而，目前关于MSCs 对宫颈癌细胞增殖、凋亡的影响及内在机制的报道较少。本实验通过集落形成实验和凋亡分子蛋白检测等方法，分析MSCs 对宫颈癌HeLa 细胞增殖凋亡能力的影响，并探讨其相关机制，为MSCs 治疗宫颈癌提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 细胞、主要试剂和仪器人HeLa 细胞为本实验室保存。胎牛血清（fetal FBS）、DMEM 培养基和胰蛋白酶-EDTA 溶液（北京百奥莱博科技有限公司），RPMI 1640 培养基（北京索莱宝科技有限公司），细胞增殖及毒性检测试剂盒（cell counting kit-8，CCK-8）（广州研创生物技术发展有限公司），Annexin Ⅴ-FITC 细胞凋亡检测试剂盒（apoptosis Detection Kit）和碘化丙啶（propidine iodide，PI）（南京碧波生物科技有限公司），兔抗人B 细胞淋巴瘤2（B-cell lymphoma-2，Bcl-2）、半胱天冬氨酸蛋白酶3（cysteinyl aspartate-specific proteinase-3，Caspase-3）和P53 单克隆抗体（一抗）以及辣根过氧化物酶（horseradish peroxidase，HRP）标记的山羊抗兔IgG（二抗）（上海碧云天生物技术有限公司），增强化学发光法（electrochemiluminescence，ECL）显色 试剂盒和Bradford 蛋白浓度测定试剂盒（北京百奥莱博科技有限公司）。……