冬凌草甲素通过调控UBC9表达对肝星状细胞增殖、凋亡的影响

梁会娟任志芳刘 伟张彦忠

(1.新乡医学院第三附属医院临床药学办公室，河南 新乡 453003；2.濮阳医学高等专科学校，河南 濮阳 457000；3.新乡医学院第三附属医院，河南 新乡 453003)

肝纤维化(hepatic fibrosis，HF)是一种常见的慢性肝损伤的伤口愈合反应，是慢性肝病最终发展为肝硬化或肝细胞癌的重要病理过程。肝星状细胞(hepatic stellate cells，HSC)是肝纤维化的关键细胞，正常肝中HSC处于静止状态，当肝受到异常刺激时，HSC活化、增殖并分泌大量细胞外基质(extracellular matrix，ECM)，导致肝ECM合成和降解失衡，促进HF形成[1]。因此，如何有效的抑制HSC增殖，诱导其凋亡是防治HF的重要措施。冬凌草甲素是从冬凌草中分离得到的二萜类化合物，具有抗炎、抗癌、神经保护等多种生物学功能[2－3]。有文献报道冬凌草甲素可诱导HSC凋亡和周期阻滞，抑制内源性和转化生长因子β1(transforming growth factorβ1，TGF-β1)诱导的ECM合成，是一种潜在的预防HF药物[4]。然而，冬凌草甲素抗HF的潜在分子机制并未完全阐明。泛素结合酶9(ubiquitin Conjugating Enzyme 9，UBC9)是小泛素样分子相关修饰物(small ubiquitin-like molecular related modifiers，SUMO)泛素化过程的唯一接合酶，研究显示UBC9参与HSC凋亡过程，下调UBC9可抑制HF进程[5]。但冬凌草甲素能否调控UBC9影响HF进程尚未可知。本研究以UBC9为切入点，探讨冬凌草甲素对大鼠肝星状细胞HSC-T6增殖、凋亡的影响和分子机制，以期为冬凌草甲素用于临床防治HF提供理论依据。

1 材料和方法

1.1 细胞

大鼠肝星状细胞HSC-T6购于美国模式生物保藏中心。

1.2 主要试剂与仪器

杜尔伯格伊戈尔培养基(dulbecco’s modified eagle medium，DMEM)、胎牛血清购于美国Gibco公司；冬凌草甲素(批号111721-201704，纯度≥99.7%)购于中国食品药品检定研究院；UBC9小干扰RNA(UBC9 small interfering RNA，si-UBC9)及……