无锡地区无偿献血者ABO亚型血型血清学及分子生物学特征研究

张震 洪俊 徐钰茜 钱惠忠 许友山

ABO亚型的鉴定常以血型血清学方法为主，由于不同ABO亚型的抗原抗体强度不同[1]，可能还有不规则抗体、自身抗体等因素的干扰，使ABO亚型不能准确地定型。除血型血清学方法外，还常采用分子生物学方法来检测ABO亚型：应用序列特异性引物引导的PCR反应（sequence specific primer，PCR-SSP）进行初步基因分型以及经DNA测序后参照标准序列进行突变位点分析[2-3]。由于分子生物学技术从基因的角度对血型进行鉴定，可以弥补血型血清学方法的缺陷，使ABO亚型的分型结果更为准确，临床输血更为安全[4]。

材料与方法

1 研究对象：选择2016年5月～2019年6月，符合《献血者健康检查要求》的献血者共120 118名，经检验科检测为ABO血型正反定型不符或疑为亚型的标本送至血液研究室进一步鉴定ABO血型，最终经血型血清学方法初步判定为ABO亚型19例。

2 试剂与仪器：抗-A、抗-B（单克隆抗体）血型试剂，ABO反定型红细胞试剂盒，抗-A1试剂，抗-H（单克隆抗体）试剂，以上试剂均由上海血液生物医药有限公司生产；抗-A、抗-B血型定型试剂（人血清）由中国医学科学院输血研究所生产；抗-AB试剂由DIAGAST公司生产；核酸（DNA）提取试剂盒（高盐法）由江苏中济万泰生物公司生产；人类红细胞ABO基因分型试剂盒由天津秀鹏生物技术公司提供。KA-2200低速离心机、KA-3500高速离心机（日本久保田公司）；水浴箱（德国MEMMERT公司）；PCR扩增仪（美国Bio-Rad公司）；电泳仪和凝胶成像分析仪（上海复日公司）。所用检测试剂均在有效期内使用。

3 方法

3.1 血型血清学方法：采用盐水试管法对标本进行ABO正反定型及吸收放散等试验，操作均按照文献[5]进行。……