重组酶聚合酶等温扩增技术在食源性致病菌检测中的应用

秦 雪，付世骞，杨鑫焱，杨 涛，高平聘，代晓斐，苗 超，满朝新，姜毓君

（东北农业大学食品学院，乳品科学教育部重点实验室，黑龙江哈尔滨 150030）

食品安全问题关乎民生之大计[1]。据估计，全球每年发生15亿例微生物感染事件，造成460万人死亡[2]，如2017年法国沙门氏菌污染事件[3]，2018年荷兰奶粉阪崎肠杆菌污染[4]，以及后来的法国奶酪大肠杆菌污染事件[5]等，给人们带来严重的生命财产损失。随着食源性疾病在各国频频爆发，食品安全问题受到了广泛重视。食源性致病菌主要有沙门氏菌、致病性大肠杆菌、副溶血性弧菌、金黄色葡萄球菌以及单增李斯特菌等，人们误食了食源性致病菌污染的食物后会产生呕吐、腹泻等症状，严重时会造成生命威胁[6]。因此，食物中食源性致病菌控制是保障食品安全的关键，而检测技术的开发与应用成为食源性致病菌控制的重要监测手段。

传统食源性致病菌检测方法主要依靠平板菌落计数法，但该方法耗时长，操作繁琐，而且灵敏度低，已不能满足我国对致病菌快速检测的要求。目前食源性致病菌的快速检测方法主要有ELISA检测[7]、胶体金免疫层析技术[8−9]以及分子检测技术[10]，其中依赖于体外核酸扩增的分子检测技术被认为是一种准确的检测方式。重组酶聚合酶等温扩增（recombinase polymerase amplification, RPA），作为一种新型等温扩增技术，相比于传统的聚合酶链式反应（polymerase chain reaction, PCR）、多重PCR等技术，摆脱了耗时长、操作繁琐以及需要贵重仪器等缺点，实现高效、灵敏、甚至在资源紧缺的现场环境条件下对食源性致病菌的快速检测。……