松果菊苷对阿尔茨海默病转基因小鼠脑内氧化应激及β-淀粉样蛋白含量的影响

李 旭 刘国力

中国医科大学附属第一医院(辽宁 沈阳 110000)

阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease,AD),是一种与年龄相关,且以记忆障碍、失语、视空间机能损害及行为异常等为特征的神经退行性疾病。主要病理学特征为神经元内出现由过度磷酸化tau蛋白聚集形成的神经原纤维缠结(neurofibrillary tangles,NFTs)以及细胞外存在大量的以β淀粉样蛋白(amyloid-β protein,Aβ)沉积形成的老年斑(senile plaque,SP)[1-3]。

研究证实,氧化应激是AD发病的主要病因之一。研究发现,AD小鼠脑内过度的氧化应激反应能够导致膜脂质过氧化、突触功能受损、线粒体损伤等,最终引起神经变性死亡[4]。松果菊苷为苯乙醇苷类化合物,其药理作用主要有抗氧化作用和神经保护作用等[5-7]。研究表明,松果菊苷分子内含有多个酚羟基,能结合体内自由基,具有明显的清除自由基和抗脂过氧化作用[8]。然而,松果菊苷能否通过抑制氧化应激反应减少Aβ沉积数量进而缓解AD发病尚未见报道。本实验通过给予AD小鼠腹腔注射松果菊苷2个月后,采用Western blot的方法考察两组小鼠脑内SOD1的蛋白表达水平,检测ROS和SOD活性探讨松果菊苷对AD模型鼠脑内氧化应激的影响,同时,利用免疫荧光染色的实验方法检测两组小鼠脑内Aβ老年斑的含量变化,行为学实验考察松果菊苷能否通过抑制氧化应激反应而改善AD小鼠的学习记忆能力,最终缓解AD小鼠发病进程的作用。

1 材料与方法

1.1材料

1.1.1 药品和试剂盒 松果菊苷(中国成都瑞芬思生物科技有限公司);β-Amyloid Antibody,SOD1,β-actin,HRP-labeled goat anti-rabbit IgG(Cell Signaling Technology),Inc.Alexa Fluor 555-labeled goat anti-rabbit IgG、(Danvers,MA,USA);ROS和SOD试剂盒(上海碧云天生物技术有限公司)、PVDF膜,蛋白Marker(Thermo)。……