易赛妮,张文娇,李良远,肖承鸿,唐鑫,刘芹,苏大鹏,胥春云,张进强,周涛
(贵州中医药大学,贵州 贵阳 550025)
小胶质细胞是中枢神经系统的固有免疫细胞,在突触连接和去除凋亡细胞中起到重要作用[1]。在正常情况下,小胶质细胞通常处于静息状态,可通过吞噬作用清除细胞碎片从而维持脑内环境稳态[2]。但当大脑发生创伤、炎症或感染时,小胶质细胞被激活,激活的小胶质细胞可分为经典(M1)表型和选择性激活(M2)表型[3]。其中M1表型的小胶质细胞可由内毒素脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导得到,其通常表现为胞体膨大,分枝缩短,呈阿米巴样形态[4],可通过分泌神经毒性物质(如ROS)和炎症细胞因子(如IL-1β、TNF-α等)产生细胞毒性作用[5-6]。已有研究证明,经典激活的小胶质细胞在神经炎症疾病中扮演着重要角色[7],故抑制小胶质细胞的M1型激活可成为治疗中枢神经系统炎症的重要途径。
马钱子苷(loganin)属环烯醚萜苷类化合物,为中国传统中药山茱萸(CornusofficinalisSieb.et Zucc.)的重要指标性成分,现已有研究发现其具有良好的抗炎、抗免疫及神经保护作用[8]。基于此,本研究以LPS刺激原代培养的小胶质细胞诱导炎症反应,探讨马钱子苷对小胶质细胞活化的影响及其分子机制,为马钱子苷应用于神经炎症的预防和治疗提供理论依据。
CFX96实时荧光定量PCR仪(美国Bio-Rad);Centrifuge 5810 R冷冻离心机(德国Eppendorf);CO2培养箱(美国Thermo Fisher);倒置荧光显微镜(日本Olympus BX51)。
马钱子苷(成都埃尔法生物科技有限公司);LPS(美国 Sigma);4%多聚甲醛固定液、引物(四川生工生物有限公司);……