中药材卷柏的分子鉴定及其总酚酸的含量测定*

席彩彩 徐云玲 戴关海 童晔玲 任泽明 陈思思 吴人照#

1 浙江省中医药研究院 浙江 杭州 310007

2 浙江大学生命科学学院 浙江 杭州 310058

中国药典2020版中规定卷柏（Selaginellae Herba）为卷柏科植物卷柏Selaginella tamariscina（Beauv.）spring或垫状卷柏Selaginella pulvinata（Hook.et Grev.）Maxim.的干燥全草[1]，所以市场上的卷柏药材植物来源有两种。卷柏（S.tamariscina）为蕨类卷柏科（Selaginellaceae）卷柏属（Selaginella）多年生草本植物，功能主要为破血散瘀，活血止血，被广泛应用于临床实践。卷柏干旱时植株向内卷成一团，颜色枯黄，一旦遇水，便会植株伸展、返绿，因此民间常称其为“九死还魂草”[2-3]。卷柏中含有大量酚酸类化合物，有很强的抗氧化活性，卷柏复苏机理与其抗氧化活性密切相关[4-5]。卷柏总酚酸含量测定未见文献报道。本文采用DNA条形码技术鉴定卷柏药材来源，采用NaOH滴定法和福林酚比色法测定卷柏总酚酸含量，为卷柏药材来源的准确快速鉴定、酚酸类化合物的研究提供参考，为揭示卷柏复苏机理及其综合开发利用提供科学依据。

1 仪器与材料

1.1 仪器与试剂：Bio-Rad C1000 PCR扩增仪、Gel Doc XR+凝胶成像系统（BIO-RAD公司）；MAPADA紫外可见分光光度计（上海美谱达仪器有限公司）；离心机TGL-16G（上海安亭科学仪器厂）；5000ml电热套、循环水式真空泵SHZ-D（Ⅲ）、旋转蒸发仪、DHG-9140A电热恒温鼓风干燥箱、万分之一分析天平JA5003B。DNA提取试剂盒（北京天根生化科技有限公司）。对照品均购自中国食品药品检定研究院，实验所用试剂均为分析纯。

1.2 材料：本实验选用5个样品材料，材料1、2和5分别为2016年11月、5月和9月自山东收集的药材全草；材料3为2016年11月采自江苏省连云港的药材全草；材料4为2016年5月自广西收集的药材全草。……