延边圈养黑熊熊源葡萄球菌分离鉴定

闵鹏飞，千慧燕，杨冰祎，宋建臣，贾立军*,刘德志

1.延边大学农学院动物医学系，吉林延吉 133000；2.吉林省磐石市富太镇畜牧服务站，吉林磐石132307

葡萄球菌是一种非常常见的人兽共患病原菌，隶属于芽孢杆菌目细球菌科葡萄球菌属，细菌形态通常为圆形或卵圆形，常呈葡萄串状排列，无芽孢，无鞭毛，无荚膜。革兰氏染色阳性。近期吉林省延边朝鲜族自治州某熊场发现一只不明原因死亡的黑熊。经过现场的初步诊断与勘察，并结合该死亡黑熊生前的临床症状、现场的初步解剖结果判断，怀疑该死亡黑熊生前很可能感染疑似葡萄球菌的病原菌。为进一步确定病因、诊治和预防黑熊的传染性疾病。本研究利用实验室诊断方法进行了分离纯化、生物化学鉴定、16S rRNA分子鉴定等操作。通过上述实验得到的数据再结合临床症状以及解剖结果，我们最终确定该菌株为金黄色葡萄球菌。本试验的顺利进行对葡萄球菌的研究工作做出了一定贡献。

1 材料与方法

1.1 试验动物

此次试验的实验动物来自于延边某熊场，现场采集死亡黑熊的肝脏、脾脏等实验材料。

1.2 主要试剂

生化鉴定管、营养琼脂、药敏纸片、质粒小提试剂盒、生化试剂管、血琼脂平板、革兰氏染色液等。细菌16S rRNA通用引物由生工生物技术有限公司合成。其它实验所用到的试剂均由延边大学预防兽医实验室提供。

1.3 细菌的分离纯化

将熊场采集的黑熊脏器放置于超净工作台上进行进一步处理。用接种环取样后，分别划线接种于营养琼脂培养基、血琼脂平板培养基和高盐甘露醇培养基。……