李峰,王罡艳,陶薪吉
肺炎是临床上常见的呼吸系统疾病,其中肺炎链球菌是诱导肺炎发生的主要原因之一。肺炎链球菌能够诱发肺泡上皮细胞凋亡和氧化损伤,从而破坏肺泡上皮完整结构,导致肺组织损伤发生。肺泡上皮细胞有两种,分别为I 型和Ⅱ型肺泡上皮细胞,Ⅱ型肺泡上皮细胞有分泌表面活性物质的作用,能够维持肺组织正常功能的发挥,Ⅱ型肺泡上皮细胞损伤也是肺炎发生的重要原因。细胞因子信号转导抑制因子1(suppressor of cytokine signaling 1,SOCS1)是SOCS家族成员,参与免疫调节、炎症反应等过程。研究显示,SOCS1 表达下调可以促进肺泡上皮细胞凋亡,并且SOCS1 还参与外界因素刺激诱导的细胞损伤发生过程。本研究自2019 年2―7 月以Ⅱ型肺泡上皮细胞来源的A549 细胞为对象,研究SOCS1 对肺炎链球菌诱导的肺泡上皮细胞损伤的影响,为明确肺炎发生机制以及SOCS1 在肺炎肺泡上皮细胞损伤中的作用提供参考。
1.1 材料
Ⅱ型肺泡上皮细胞来源的A549 细胞购自美国标准生物品收藏中心(American Type Culture Collection,ATCC);Lipofectamine 2000转染试剂购自美国Invitrogen;丙二醛(malonaldehyde,MDA)含量检测试剂盒、JC-1 线粒体膜电位检测试剂盒均购自上海碧云天生物技术有限公司;pcDNA3.1、pcD‑NA3.1-SOCS1由北京信诺金达生物科技有限公司构建;肺炎链球菌R6 购自美国ATCC;cDNA 合成试剂盒购自天根生化科技(北京)有限公司;活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(C-caspase-3)、SOCS1 抗体、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-9(C-caspase-9)抗体、细胞色素C(Cytochrome C)抗体均购自美国Santa Cruz;乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)含量检测试剂盒、超氧化物歧化酶(superoxide orgotein dismutase,SOD)活性检测试剂盒均购自南京建成生物工程研究所;……