灵芝多糖对B16F10黑素瘤细胞产生白介素10的影响

孙 博，孙 宇，车姣子，李雪飞，陆 洁，段昕所*

（1.承德医学院附属医院，河北承德 067000； 2.承德市中心医院）

黑素瘤是由正常黑素细胞或神经嵴细胞癌化后的黑素细胞导致的恶性肿瘤[1]，具有恶性程度高、易转移的特点。世界范围内，每年大约有9000例患者死于黑素瘤，在皮肤肿瘤死亡患者中约占60%～80%，我国每年新发病例约2万多例，美国疾控中心预测黑素瘤患者的数量在未来15年内还会增加[2-4]。抑制并逃避机体免疫系统而得以生存与黑素瘤细胞自身存活密切相关，目前已知黑素瘤细胞可以通过自分泌—旁分泌等途径分泌IL-10、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）、转化生长因子β（transforming growth factor-β，TGF-β）等免疫抑制因子来逃避免疫监视，逃避机体免疫系统的识别与攻击，为肿瘤的发生及发展创造有利的微环境[5]。灵芝多糖是一种从灵芝子实体中被提取出来的多糖组份，已有研究表明，灵芝多糖具有一定的免疫调节功能以及一定的抗肿瘤等作用[6]。灵芝多糖如何抑制肿瘤细胞的免疫逃逸仍是目前研究的热点内容。本研究通过探讨灵芝多糖对B16F10黑素瘤细胞产生IL-10的影响，进一步明确黑素瘤发生发展机制，为黑素瘤治疗提供依据。

1 材料与方法

1.1 主要实验材料与试剂

灵芝多糖为福州绿谷生物药业技术研究所分离提取，北京大学医学部基础医学院药理学系林志彬教授惠赠。B16F10黑素瘤细胞株（协和医科大学细胞库），胎牛血清（FBS，天津血液学研究所），IL-10一抗、β-actin一抗（美国Santa Cruz公司），Western-blot二抗（北京中杉金桥生物技术有限公司），RPMI-1640、Trizo（美国Invitrogen公司），AMV反转录试剂盒引物由上海生工生物公司设计合成。……