二维液相色谱法同时测定人血浆中伊马替尼及其代谢产物浓度的方法学研究*

董馨蔚，蒋刚，马松涛，陈燕

610500 成都，成都医学院 药学院(董馨蔚、马松涛)；610041 成都，四川省肿瘤医院·研究所，四川省癌症防治中心，电子科技大学医学院 临床药学部(蒋刚、陈燕)

甲磺酸伊马替尼(imatinib mesylate,IM)是一种小分子蛋白酪氨酸激酶抑制剂，分子式为C29H31N7O·CH4SO3，可有效抑制BCR-ABL酪氨酸激酶及c-Kit等的活性，其作为靶向药物，临床用于治疗慢性粒细胞白血病、不可切除/或发生转移的胃肠间质瘤(gastrointestinal stromal tumors,GIST)、急性淋巴细胞白血病等。IM在人体内主要循环代谢产物是N-{4-甲基-3-[(4-吡啶-3-嘧啶-2-基)氨基]苯基}-4-(哌嗪-1-甲基)-苯甲酰胺(N-去甲基伊马替尼，N-Desmethyl imatinib，NDI)，其药效与原型药相似，且IM作为口服小分子靶向药物，存在巨大的个体内差异及个体间差异[1]，而多项研究表明IM血药浓度与患者临床反应及获益存在相关性[2-4]，故IM及其代谢产物的血药浓度监测在临床科学制定合理用药方案及精准个体化治疗中具有重要意义。

二维液相色谱(two-dimensional liquid chromatography with ultraviolet detection,2D-LC-UV)系统由全自动2D-LC-UV耦合仪与岛津高效液相色谱(high-performance liquid chromatography,HPLC)仪组成进行药物浓度测定。所有部件由耦合仪连接，包括自动进样器，一维色谱泵，中间转移系统，二维色谱泵，紫外检测器等模块；血液样品经自动化处理后，传递至后级HPLC进行定量分析。具体结构见图1。本文采用其二级单工模式建立一种同时测定人血浆中IM和NDI浓度的方法，主要经过一维液相色谱系统(以下简称LC1)进样、目标物转移、二维液相色谱系统(以下简称LC2)进样三个步骤；LC1进样：样品从自动进样器进入流路系统中，首先经过一维萃取柱进行第一次分离(图1A)；……