猪圆环病毒3型PCR检测方法的建立及应用

杨 威，田 青,，赵兴华，何 欣，赵志强，刘 月，段保宁，程 龙，郑丽丽，李杰峰

（1.河北省畜牧兽医研究所，保定 071000；2.河北农业大学动物医学院，保定 071000；3.邯郸市饲料工业办公室，邯郸 056002；4.邯郸市动物疫病预防控制中心，邯郸 056002）

猪圆环病毒（Porcine circovirus，PCV）是到目前已知最小的动物病毒[1]，PCV属于圆环病毒科圆环病毒属，为单股环状DNA病毒。现已知3个血清型，即PCV1、PCV2和PCV3。猪圆环病毒3型（Porcine circovirus type 3，PCV3）是一种新型的猪圆环病毒，于2015年在美国被发现，该病毒基因组长2.0 kb[2]，同PCV1、PCV2相似，也包含两个开放阅读框（Rep和Cap）。已有研究表明，PCV3可能垂直传播或导致母猪繁殖障碍[2-3]，美国学者Phan等[4]发现猪圆环病毒3型Rep蛋白编码296aa，但其却并非以ATG起始编码，另外位于互补链上的Cap蛋白编码231aa。

2016年，致病性的PCV3首次在我国被发现。目前，该病原在我国的8个省及1个直辖市均可以检测到。猪圆环病毒3型感染以后会导致机体免疫系统障碍，引起免疫疾病、继发感染等。PCV3在国内外已逐渐呈现流行的趋势，给生猪养殖产业造成相当大的经济损失。目前国内尚缺乏猪圆环病毒3型的快速检测方法，因此，建立一种针对猪圆环病毒3型快速的检测方法具有重要意义。本研究针对PCV3建立快速检测方法，为PCV3检测、流行病学监测以及发病机理的研究提供技术支持。

1 材料和方法

1.1 病料及阳性模板 本实验采用的猪圆环病毒3型阳性病料为来自本实验室保存的样本。猪圆环病毒2型（Porcine circovirus type 2，PCV2）、伪狂犬病病毒（Pseudorabies virus，PRV）阳性核酸均来自于本实验室。特异性实验所用猪细小病毒（Porcine parvovirus，PPV）、猪瘟病毒（Classical swine fever virus，CSFV)、高致病性猪繁殖与……