淫羊藿苷通过AMPK/mTOR 信号抑制自噬减轻糖尿病心肌肥厚研究

吴 冰，张 莲，郭 烽

（中国人民解放军联勤保障部队第940 医院老年科，甘肃 兰州 730050）

糖尿病发病率逐年升高，而心脏并发症是糖尿病患者死亡的主要原因之一，主要表现为心脏充盈受损，舒张功能下降，心肌肥厚和纤维化，称为糖尿病心肌病（diabetes acrdiomyopathy，DCM）。最新研究发现，糖尿病患者心肌自噬活性增加［1］，而细胞自噬与心肌肥厚关系密切［2］。

淫羊藿苷（Icariin）是淫羊藿的主要活性成分，具有改善性功能、抗衰老、抗炎、减轻缺血损伤等作用。Icariin 能通过不同的信号通路调节自噬，且能减轻心肌纤维化［3］和心脏重构［4］。然而，Icariin 能否通过调节自噬改善糖尿病心肌肥厚，国内外未见相关报道。因此，本研究拟构建糖尿病小鼠动物模型，观察Icariin 对糖尿病心肌肥厚的影响并探究相关机制。

1 材料与方法

1.1 实验材料

雄性C57BL/6 小鼠购自联勤保障部队第940医院实验动物中心。链脲佐霉素（Streptozocin，STZ）、Icariin、mTOR 抑制剂雷帕霉素（Rapamycin）购自Sigma 公司；Beclin1、微管相关蛋白1 轻链-3B（MAP1LC3B，LC3B）、磷酸腺苷激活的蛋白激酶（AMP-activated protein kinase，AMPK）（#2532）、磷酸化的AMPK（p-AMPK）（#2531）、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin，mTOR）（#2983）、磷酸化的mTOR（p-mTOR）（#5536）抗体购自Cell Signaling Technology 公司；β-肌动蛋白（β-actin）抗体及荧光标记的二抗购自北京康为世纪生物科技有限公司；B 型尿钠肽（brain natriuretic peptide，BNP）和β-肌球蛋白重链（β-myosin heavy chain，β-MHC）引物由上海基康生物技术有限公司合成。

1.2 糖尿病小鼠的建立

雄性C57BL/6 小鼠禁食12 h，腹腔注射55 mg/kg 1% STZ 柠檬酸盐缓冲溶液，正常对照组小鼠注射相同体积的柠檬酸盐缓冲液。连续注射5 d，每次注射后恢复自由取食。STZ 注射7 d后，测空腹血糖，空腹血糖为13.5～25 mmol/L，视为造模成功。

1.3 实验分组及干预

24 只实验C57BL/6 小鼠饲养于联……