恐伤孕鼠对其子代股骨早期发育和骨代谢影响❋

亓照耀， 杨 帆， 吕孟可， 杨丽萍， 袁海燕， 闫民泽， 张慧娜

(河南中医药大学，郑州 450046)

中医自古就对恐、肾、骨三者的关系有深刻认识。在《黄帝内经》中就已提出“肾主骨”理论，其中《素问·阴阳应象大论篇》曰：“肾生骨髓……其志为恐，恐伤肾”。恐能伤肾，影响肾先天之精气[1]。《灵枢·本神》又载：“恐惧而不解则伤精，精伤则骨酸痿厥，精时自下。[2]”现代研究提示，恐惧应激可激活孕鼠下丘脑-垂体-肾上腺皮质(HPA)轴，继而影响孕鼠健康，表现出糖皮质激素(GC)水平升高[3]。恐伤孕鼠会造成其幼年仔鼠情志改变，对仔鼠的一般发育及神经发育造成不良影响[4，5]。但母代孕期恐惧应激导致的“肾精亏虚”是否影响子代骨的早期发育鲜见报道。

本研究从“恐伤肾，肾主骨”角度探讨孕期恐伤刺激对56日龄仔鼠股骨发育和血清骨代谢指标I型胶原羧基端交联肽(CTX-I)、骨源性碱性磷酸酶(BALP)和I型前胶原氨基端原肽(PINP)的改变，探索恐伤孕鼠对子代骨发育的影响，论证“恐伤肾虚致胎损”的中医经典理论，揭示“胎损”在骨发育方面的表现及机制。本研究已通过河南中医药大学动物伦理委员会审查，伦理许可证号DWLL2018030017。

1 材料与方法

1.1 动物

7周龄Wistar大鼠40只，雌鼠25只，雄鼠15只，其中雄性270～320 g，雌性180～220 g，由北京维通利华实验动物公司提供许可证号SCXK(京)2016-0006。实验在河南中医药大学实验动物中心进行，饲养环境为温度20 ℃±5℃、湿度40%±15%和12 h明暗循环。适应性喂养1周后，首先采用旷场实验进行行为基线测试，选取基线水平一致且体格较强壮的雄鼠和雌鼠在晚20∶00进行合笼，第2天8∶00检查是否有阴栓，若有则为受孕0.5 d，反之继续合笼。