合浦珠母贝nacrein基因真核表达载体构建及生物信息学分析

刘鹏，兰太进，杨宇华，杨大航，焦扬，李论，黎睿，林江

(广西中医药大学 基础医学院，广西 南宁，530200)

合浦珠母贝(Pinctadafucata)又名马氏珠母贝(Pinctadamartensii)，盛产于我国广西北海合浦。合浦珠母贝外套膜对珍珠和贝壳的形成起重要作用，在正常生理条件下外套膜分泌外液形成贝壳；而当表皮细胞受伤或受到外来刺激后，表皮细胞发生病理变化，形成珍珠囊，继而分泌珍珠质形成珍珠[1-2]。合浦珠母贝贝壳有3层，由内至外分别为珍珠层、棱柱层和角质层，其中，珍珠层和珍珠的化学组成和结构基本相同，由95%以上的文石型碳酸钙和低于5%的有机基质组成[3]。Nacrein蛋白是第1个被确认的软体动物有机基质成分，被认为与珍珠层的形成有关[4]。Nacrein是一种水溶性基质蛋白，存在多种软体动物的贝壳中，如合浦珠母贝的贝壳和珍珠，长牡蛎(Crassostreagigas)、虾夷扇贝(Mizuhopectenyessoensis)、岩牡蛎(Crassostreanippona)等的贝壳[4-5]。合浦珍珠作为一种传统名贵中药，具有镇静安神、养阴熄风、清热解毒、明目去翳、解毒生肌、美容和抗衰老等功效[6]。本课题组比较关注合浦珍珠抗菌功效，前期发现合浦珍珠提取物具有显著的体外抑制金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、伤寒杆菌和绿脓杆菌的活性[7-8]，吴燕燕等[9]报道合浦珠母贝肉风味蛋白酶酶解肽具有显著抗菌效果，石耀华等[10]从马氏珠母贝腹足中克隆出一个推测的肿瘤抑制因子，但迄今为止，关于合浦珠母贝相关的具体药效物质基础研究比较薄弱。基于前期从合浦珍珠粉水溶性提取物中鉴定到大量的Nacrein蛋白(由……