孕妇外周血无创基因检测在产前诊断中的应用*

纪 利 马 莉 许海燕 曹亚莉 王 娜 韩英杰

（济宁医学院附属济宁市第一人民医院，济宁 272011）

无创产前基因检测（noninvasive prenatal testing，NIPT）是通过采集孕妇外周血（5ml），提取游离DNA，采用新一代高通量测序技术，结合生物信息分析，得出胎儿患染色体非整倍性疾病（21三体又称唐氏综合征，18三体，13三体）风险率的技术。此技术最早是1997年香港中文大学卢煜明教授在怀有男性胎儿的孕妇外周血中扩增到了Y染色体的片段，正常女性体内不含有Y染色体，从而证明了孕妇外周血中存在胎儿游离DNA，开启了探索NIPT新技术的思路[1]。NIPT技术以安全、简单、实用等特点在临床得到广泛应用。NIPT临床应用指征和阳性预测值评价尚不完善。本文通过本中心的研究数据，对NIPT阳性预测值和假阳性等进行比较分析，从而探讨NIPT在胎儿染色体非整倍体的诊断中应用价值，为该技术在产前诊断中的合理应用提供良好的临床依据。

1 资料与方法

1．1 一般资料

本中心收集2016年1月－2019年12月在济宁市第一人民医院行NIPT孕妇共8828例，其中高龄孕妇选择NIPT 4200例，血清学筛查高风险643例，血清学筛查临界风险2200例，超声软指标异常338例，双胎／IVF-ET 634例，错过唐筛选择NIPT替代108例，拒绝唐筛要求NIPT 610例，其他95例。见表1。本研究获本院伦理委员会批准。

表1 2016－2019年孕妇行NIPT的临床因素分析（n）

1．2 方法

1.2.1 试剂和仪器 无创DNA的试剂盒采用贝瑞和康试剂盒，采用贝瑞和康NextSep CN500测序平台。羊水穿刺采用Thermo培养箱，芯片采用Human CytoSNP-12芯片。羊水培养基采用白云山细胞培养基。

1.2.2 NIPT检测 抽取孕妇外周血5ml用EDTA抗凝，提取血浆游离DNA，采用NextSep CN500高通量测序仪检测，结果进行高通量分析，并通过生物信息学分析计算Z值，正常值为Z值介于-3～3之间，当Z值＞3，三体高风险，当 Z值＜-3，单体高风险。……