替莫唑胺可诱导胶质瘤细胞高表达PDL1

文雪

摘要：目的：PDL1广泛表达于肿瘤组织，因此，PDL1/PD1通路可能在肿瘤免疫逃逸中起到一定作用。本研究通过检测化疗药物作用前后PDL1在胶质瘤细胞的表达情况，为进一步研究其在胶质瘤靶向治疗中的作用提供实验依据。方法 利用流式细胞仪检测化疗药物作用前后PDL1在胶质瘤细胞株的表达。结果：胶质瘤细胞株高表达PDL1，化疗药物作用后PDL1的表达显著升高。结论 PDL1可以作为胶质瘤治疗的潜在靶点。

关键词：PDL1;胶质瘤;化疗药物

Abstract： Objective PDL1 is widely expressed in tumor tissues. Therefore， the PDL1/PD1 pathway may play a role in tumor immune escape. This study detected the expression of PDL1 in glioma cells before and after the action of chemotherapeutics， and provided experimental evidence for further research on its role in targeted therapy of glioma. Methods Flow cytometry was used to detect the expression of PDL1 in glioma cell lines before and after the action of chemotherapy drugs. Results The glioma cell line highly expressed PDL1， and the expression of PDL1 was significantly increased after chemotherapeutic drugs. Conclusion PDL1 can be used as a potential target for the treatment of glioma.

Keywords： PDL1; glioma; chemotherapy drugs

程序性死亡配體-1 （PDL1） 是一种主要的免疫检查点配体分子，它在肿瘤和不同类型癌症的肿瘤微环境中上调表达[1]。临床研究证实，抑制PDL1与程序性细胞死亡受体 （PD1）在各种类型的免疫细胞（包括抗原呈递细胞、效应 T 细胞、自然杀伤细胞 （NK）、胸腺细胞、骨髓细胞）上表达，阻断其相互作用，能够诱导免疫系统对肿瘤的持久控制和抑制不同类型的癌症 [2-4]。本研究通过检测PDL1在不同胶质瘤细胞株的表达情况，为研究负性调节分子PDL1的表达与胶质瘤细胞对化疗药物抵抗的相关性及免疫逃逸机制提供实验依据。

1 材料及方法

1.1细胞及试剂 U251 细胞系为本实验室冻存;替莫唑胺（TMZ）购自先灵葆雅公司;DMEM培养基购自Gibco公司;胰酶购自Sigma公司;抗PDL1抗体购自eBioscience公司。

1.2 细胞培养 将冻存的U251细胞复苏后，以每孔200个细胞培养在含有15%胎牛血清DMEM培养基的六孔板中，置于37℃、5%CO2条件下培养。24小时后，将培养基更换为包含TMZ（0、25、50和100μmol/L），共同孵育72小时。

1.3流式细胞术检测PDL1的表达 胰酶消化并收集上述各组肿瘤细胞，然后用冰冷的PBS洗涤，按照试剂说明加入抗PDL1抗体，采用流式细胞术检测并分析结果。……