载CXCL12抗体靶向超声微泡制备及其体外卵巢癌细胞粘附性实验①

付丽君，向 红，曾倩倩，胡 蓉

（新疆医科大学第一附属医院妇产超声科，乌鲁木齐830054）

通常患者被诊断为卵巢癌时，肿瘤已经发展到中晚期，且肿瘤病灶已经发生转移，从而导致患者失去早期治疗时机，预后差[1-2]。卵巢癌的早期诊断能够提高患者的生存率[3-4]。在临床上，超声造影技术应用较为广泛，近年来，该技术有了飞速的发展[5]，而靶向超声微泡可在微泡表面上携带靶分子抗体，借助抗原抗体的特异性结合，在靶器官或靶组织区停留，实现特异性增强显影[6-7]。研究表明，基质细胞延伸因子1（CXCL12）能够与其趋化因子受体CXCR4组合，从而形成信号轴CXCL12/CXCR4，该信号轴可以对卵巢癌细胞进行调控[8-9]。本研究以CXCL12作为研究靶点，通过采用生物素-亲和素连接法将CXCL12抗体与普通微泡结合制备携CXCL12抗体的靶向超声微泡，通过一般物理特性检测和细胞爬片实验，评价靶向微泡与靶组织的体外结合能力，旨在为肿瘤的早期诊疗研究提供实验数据。

1 材料和方法

1.1 主要材料人卵巢癌细胞株SKOV3（购自武汉普诺赛生命科技有限公司），高糖培养基（Hyclone公司）；磷酸盐缓冲液；胎牛血清（Hyclone，USA）；Anti-CXCL12（博奥森生物科技有限公司）；链酶亲和素（Streptavidin，SA，Sigma，USA）；罗丹明标记山羊抗兔IgG（北京中衫金桥）；凝胶制备试剂盒（Solarbio公司）。

1.2 培养人卵巢癌细胞株SKOV3细胞

1.2.1 细胞复苏 将SKOV3细胞放到提前加热好的水浴锅中，使得冻存的细胞快速溶解开。待冻存管中的细胞基本上融化后，于离心机中离心5 min。弃去离心过的细胞上清液，剩下冻存管中的下层细胞小心放到超净台上，防止细胞污染，最后加入培养基，用取样枪进行吹打混匀后，培养并观察。……