免疫亲和柱-液质联用法测定饼干中 赭曲霉毒素A的含量

孙小杰，王玉梅，刘 真，姜 星

（南京市食品药品监督检验院，江苏南京 211198）

赭曲霉毒素是真菌毒素之一，是由纯绿青霉、赭曲霉及碳黑曲霉等产毒菌株污染粮食、食品、饲料及其他农副产品后所产生的一种有毒代谢产物，有A、B、C、D4种化合物，其中毒性最大的是赭曲霉毒素A[1]。赭曲霉毒素A对动物和人的毒性主要有肾脏毒、肝毒、致畸、致癌、致突变和免疫抑制作用[2]。为了保障人们的身体健康，《食品安全国家标准 食品中真菌毒素限量》（GB 2761—2017）规定了谷物及其制品中赭曲霉毒素A的限量为5.0 µg/kg[3]。

2021年4月，欧盟食品和饲料快速预警系统通报出口至我国的薄脆饼干中赭曲霉毒素A含量不合格，目前文献报道的赭曲霉毒素A的测定方法主要涉及粮食及其制品、咖啡、酒[4-6]，针对饼干中赭曲霉毒素A测定技术的研究较少。因此有必要建立饼干中赭曲霉毒素A的方法，为饼干中赭曲霉毒素A的含量测定提供技术支撑。

1 试验部分

1.1 主要仪器与试剂

液相色谱-串联质谱仪：Agilent 1260 HPLC-6470型，配有电喷雾离子源，美国 Agilent公司；电子天平：XS205型，瑞士Metler-Toledo公司；固相萃取装置：Wat200609，美国Waters公司；免疫亲和柱：3 mL,青岛普瑞邦生物工程有限公司；氮吹仪：N-EVAP，美国Organomation公司；离心机：ROTINA 35，德国Hettich公司。

甲醇、乙腈、甲酸：色谱纯，美国ROE公司；甲酸铵、冰乙酸、氯化钠、碳酸氢钠、磷酸氢钠、磷酸二氢钾、氯化钾、吐温20：分析纯，国药集团化学试剂有限公司；赭曲霉毒素标准物质：上海安谱实验科技股份有限公司；实验室用水为经Mili-Q净化系统（0.22 µm过滤膜）过滤的超纯水；真菌毒素清洗缓冲液：先将12.5 g氯化钠、2.5 g碳酸氢钠溶于约250 mL水中，加入0.05 mL吐温20，用水定容至500 mL；……