新冠病毒核酸检测系统的性能验证及评价

韶 萌，刘春霞

(南通大学附属瑞慈医院检验科，南通 226010)

自2019 年12 月以来，世界各地陆续爆发了新型冠状病毒(coronavirus disease 2019,COVID-19)感染。该病毒为β 属冠状病毒，为有包膜的RNA 病毒[1]，与重症急性呼吸综合征冠状病毒(severe acute respiratory syndromes coronavirus,SARS-CoV)高度同源，传染性强于SARS-CoV[2]。感染症状常表现为干咳、发热和乏力，严重的可发展为急性呼吸窘迫综合征、脓毒血症休克、难以纠正的代谢性酸中毒和出凝血功能障碍及多器官功能衰竭等。国家卫生健康委陆续发布了8 个版本的COVID-19 诊疗指南，均将病原学检测作为COVID-19 诊断的确诊指标，逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)是在日常工作中使用最广泛的检测方法[3]。为评估江苏硕世生物科技股份有限公司的核酸检测试剂使用乐普96 通道PCR 仪(Lepgen-96)检测结果是否能满足临床需求，本文依照中国合格评定国家认可委员会(China National Accreditation Ser vice for Conformity Assessment,CNAS)发布的CNASGL039《分子诊断检验程序性能验证指南》[4]进行了性能验证实验，并做出评估。

1 材料与方法

1.1 实验材料 本实验使用了卫生部2020 年第2次COVID-19 核酸检测室间质评活动发放的样本，江苏省临床检验中心2020 年第3 次COVID-19核酸检测室间质评活动发放的样本，样本均为基因工程方法制备的病毒样颗粒模拟样本。江苏硕世生物科技股份有限公司提供的含ORF1ab 基因、N 基因及内标片段的病毒样颗粒的阳性对照品。核酸提取及纯化试剂(批号：20201105)及核酸检测试剂盒(批号：20201119)均由江苏硕世生物科技股份有限公司生产。实时荧光PCR 仪为乐普科技Lepgen-96。

1.2 检测方法及结果判读 参照产品说明书，循环参数为：50 ℃10 min；97 ℃1 min；97 ℃5 s；58 ℃30 s，共45 个循环，并进行实时荧光检测。……