miR-509-3p与Rab11a在喉鳞状细胞癌中的表达及其意义①

金秀琳，詹俊杰，范宗宪

(佳木斯大学附属第一院耳鼻喉科，黑龙江 佳木斯 154003)

喉癌是耳鼻咽喉头颈外科多发病之一，其分子发病机制的研究目前还有待深入，喉癌患者的早期诊断对精准特异化治疗至关重要，因此急需探明喉癌基因源性发病机制。微小RNA (microRNA, miRNA)是由小于30个核苷酸序列组成的不直接翻译蛋白产物的小RNA，参与细胞新陈代谢、复制增殖及自噬凋亡等重要生命过程[1,2]。经研究发现miR-509-3p为调节肿瘤发生发展的重要因子。本研究运用RT-qPCR检测miR-509-3p和预测靶标基因Rab11a在喉癌及癌旁组织中的表达量；再行miR-509-3p mimics转染Hep-2细胞，检测Rab11a的表达量，分析miR-509-3p和Rab11a的相关性。为寻求喉癌的分子发病机制提供一定的参考依据。通过对miR-509-3p在喉癌中的重要作用，将为今后喉癌miRNAs的诊断治疗提供新视点。

1 材料与方法

选取2019-01～2019-10于佳木斯大学附属第一医院耳鼻喉科治疗的术中新鲜标本15例，均为初次患病，术前未经放疗及化疗且病理报告为喉部鳞状细胞癌。癌标本切取肿瘤主体，避开坏死区域；癌旁正常标本取距肿瘤安全缘0.5cm以上的组织。标本离体清洁后，半小时内置于无RNA酶的专用冻存管液氮罐中速冻。15例喉癌患者中，男12例，女3例，年龄52～76岁，平均62.4岁。其中TNM分期依照UICC2002第6版喉癌分期标准[3]，其中II期3例，III期9例，Ⅳ型3例。组织学类型依照1990年WHO喉癌分类标准[4]分类，其中高分化型5例，中分化型8例，低分化型2例。

1.1 试剂与仪器

Trizol RNA提取液(天根)，PerfectStart Green qPCR SuperMix(AQ601-04全式金)，oligdT(擎科)，RNase inhibitor(E00381 Thermo)，RevertAid Reverse Transcriptase(EP0441 Thermo)，实时荧光定量PCR仪(Q1 ABI)，超微量核酸分析仪(Nano-200 杭州奥盛仪器有限公司)，冷冻离心机(H2100R 湖南湘仪实验室仪器开发有限公司)等。……