检测中生菌素的高效液相色谱法

张楠潘忠成杨宏勃李双双李蒲民

(1.陕西麦可罗生物科技有限公司，陕西 渭南 714200;2.哈尔滨工程大学材料科学与化学工程学院教育部超轻材料与表面技术重点实验室，黑龙江 哈尔滨 150001)

中生菌素(Zhongshengmycin)又名农抗751，属N-糖苷类抗生素，是浅灰色链霉菌海南变种(Streptomyces lavendulae var heinanensis n.var)的代谢产物。对细菌、真菌及昆虫具有活性。该产生菌是中国农业科学院生物防治研究所从海南土壤中分离得到的[1]。中生菌素有效成分为链丝菌素(Streptothricins)F，是由Waksman等[2]于1942年从Streptomyces lavendulae中分离到的。随后，链丝菌素的其它组分(链丝菌素A、B、C、D、E和X)也相继被发现，其各组分的结构中均包含一分子古洛糖胺、一分子链里定内酰胺和数量不等的β-赖氨酸[3,7]，见图1。

图1 中生菌素标准品液相色谱图

国内目前对于中生菌素的检测以生物测定法为主，而生物测定法在生产上因其检测局限性及特异性较差，无法广泛用于生产。2012年西北农林科技大学报道了液质联用法检测中生菌素[8]，该检测方法精密度线性加标回收率良好，但是由于液质联用仪价格高昂，很难在实际生产中普及。而目前国内中生菌素生产厂家达40多家，品种100多个，因此建立一个有效便捷的检测方法很有必要。本文采用高效液相色谱法对中生菌素母药及中生菌素可湿性粉剂中各有效成分进行定性定量分析,该方法操作简单快速、定量分析准确，易于推广。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

岛津LC-20A高效液相色谱仪，配制DAD检测器；Waters symetryshield RP18，粒径5μm，150mm×4.6mm(id)不锈钢色谱柱；中生菌素B～F标准品(西安麦斯迪生物工程有限公司提供)，各组分纯度均>90%；中……