王 飞,钟圣伟,李 勇,胡小芬,周作红,杨姗姗
(江西农业大学 动物科学技术学院 江西 南昌 330045)
【研究意义】羊驼具有观赏和毛用双重价值。目前,一般采用化学染料对动物毛发进行染色,以获得颜色多样的动物绒毛制品,但是化学染色对环境和健康的负面影响很大。对毛色发生机制的研究,为获得人为控制的天然动物毛色提供重要理论意义。【前人研究进展】miRNAs,一类长度约为22个核苷酸的内源性非编码RNA,通过与靶基因mRNA 的3′-UTR 不完全互补配对,从而调控基因在转录后水平的表达[1]。近年来,越来越多的研究表明miRNAs调控许多重要的生物进程,如肿瘤的发生、炎症和发育等[2]。miRNAs对动物毛色的表型或黑色素生成具有一定的影响,如miR-137通过靶向MITF导致小鼠毛色从黑色变为棕灰色[3]。【本研究切入点】基于实验室前期的研究[4],发现miR-7081-5p在白色和棕色羊驼皮肤中呈差异表达,推测miR-7081-5p 可能参与毛色的形成。通过miRBase、TargetScan 等生物信息学软件预测miR-7081-5p的靶基因,均发现sex-determining region Y-box 6(SOX6)为miR-7081-5p的靶基因之一。最近的研究表明SOX6在色素生成中具有一定的作用[5]。因此推测miR-7081-5p可能通过抑制靶基因SOX6的表达进而影响黑色素细胞内色素的生成。【拟解决的关键问题】本研究通过在羊驼黑色素细胞中过表达miR-7081-5p检测SOX6及相关色素生成基因的表达变化,酪氨酸酶活性的变化,以及总黑色素,真黑素和褐黑素的含量变化,从而为揭示miR-7081-5p靶向SOX6在色素生成过程中的分子机制提供理论基础。
黑色素细胞专用培养基(Sciencell,美国),基因定……